一种金线莲组培苗快速繁殖方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106718903A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201611150942.3(22)申请日2016.12.14(71)申请人中国科学院华南植物园地址510650广东省广州市天河区兴科路723号(72)发明人吴坤林郑枫曾宋君张建霞张新华马国华段俊(74)专利代理机构广州科粤专利商标代理有限公司44001代理人刘明星(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书6页(54)发明名称一种金线莲组培苗快速繁殖方法(57)摘要本发明公开了一种金线莲组培苗快速繁殖方法。本发明利用广东从化天湖金线莲的优良株系为外植体进行无性克隆快速繁殖种苗，确保种苗保持原有优良种性及其药效，利用培养容器横放和全自然光的培养方式，可有效解决金线莲组培快繁中污染率常常高于15％的难题，同时不用荧光灯作为光源，明显降低了生产成本，经济效益更加显著。本发明的方法具有低成本，种性强，药效高的特点，提高了金线莲种苗使用的安全性，对濒危紧缺金线莲药用植物资源再生和持续利用具有十分重要意义，满足健康产业对珍贵中药材金线莲的巨大市场需求。CN106718903ACN106718903A权利要求书1/1页1.一种金线莲组培苗快速繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：A、选取天湖金线莲的健康株系，去掉根、叶片和叶鞘，取其茎条，洗净后切成带节茎段，消毒后接种到不定芽诱导培养基J1上，培养温度为23±2℃，光照强度500～1000lx，光照12h/d，获得不定芽，所述的不定芽诱导培养基J1每升含花宝1号1～2g，蛋白胨0.5～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，6-苄基腺嘌呤2.0～5.0mg，萘乙酸0.2～0.5mg，蔗糖15～20g，琼脂6～7g，pH5.4-5.6；B、分切不定芽，将高小于3厘米的丛生芽插植于玻璃培养瓶中的增殖培养基J2上，把高大于3厘米的不定芽单株插植于生根培养基JR上，用瓶塞塞住玻璃培养瓶的瓶口，将含有不定芽的增殖培养基J2和生根培养基JR的玻璃培养瓶横放于全自然光培养室中的培养架上，瓶口统一朝一方向，散射光能直接照射不定芽上，培养温度23-25℃，光照强度1000-3000lx，光照时间10-16h/d下培养，当增殖培养基J2在培养下收获增殖材料不定芽，增殖材料不定芽继续接种至新的玻璃培养瓶中的增殖培养基J2上，用瓶塞塞住玻璃培养瓶的瓶口，将含有不定芽的增殖培养基J2的玻璃培养瓶横放于全自然光培养室中的培养架上，瓶口统一朝一方向，散射光能直接照射不定芽上，培养条件为培养温度23-25℃，光照强度1000-3000lx，光照时间10-16h/d下培养，当增殖材料不定芽培养一个继代周期后进行接种转移，高小于3厘米的丛生芽插植于增殖培养基J2中，高大于3厘米的不定芽单株插植于生根培养基JR，如此循环，生根培养基JR上的不定芽长根后成为完整植株进行出瓶移栽；所述的增殖培养基J2每升含花宝1号2～3g，蛋白胨0.5～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，6-苄基腺嘌呤2.0～3.0mg，萘乙酸0.2～0.5mg，蔗糖20～30g，琼脂6～7g，pH5.4-5.6；所述的生根培养基JR每升含花宝1号2～3g，蛋白胨0.5～2g，肌醇80～120mg，甘氨酸1.5～2.5mg，盐酸硫胺素0.05～0.2mg，盐酸吡哆醇0.4～0.8mg，烟酸0.4～0.8mg，6-苄基腺嘌呤0.2～0.5mg，萘乙酸2～5mg，活性碳500～1000mg，蔗糖20～30g，琼脂6～7g，pH5.4-5.6。2.根据权利要求1所述的金线莲组培苗快速繁殖方法，其特征在于，将步骤A的不定芽转接到不定芽诱导培养基J1上进行继代培养，培养温度为23±2℃，光照度500～1000lx，光照12h/d，继代周期为35-40天，继代培养4-5次后可获得大量的不定芽作为无性繁殖材料。3.根据权利要求1所述的金线莲组培苗快速繁殖方法，其特征在于，所述的步骤A的消毒是将带节茎段，先用体积分数75％酒精水溶液浸泡30s，再在质量分数0.1％升汞水溶液中浸泡并摇动5～16min，无菌水冲洗3次后，用无菌纸吸干茎段表面水分，并切去两端各1～2mm，再接种到不定芽诱导培养基J1。2CN106718903A说明书1/6页一种金线莲组培苗快速繁殖方法技术领域：[0001]本发明属于植物繁殖领域，具体涉及一种金线莲组培苗快速繁殖方法。背景技术：[0002]金线莲别名金线兰、金丝草，是兰科(