一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107018898A(43)申请公布日2017.08.08(21)申请号201710231766.4(22)申请日2017.04.11(71)申请人武威市林业科学研究院地址733000甘肃省武威市凉州区七架沙滩(72)发明人史星雲罗祥刘伟牟德生王长永王多文李强张明秀银玉萍张军何彩金娜郭艳兰(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页说明书3页(54)发明名称一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法(57)摘要本发明公开了一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法，其以B5培养基为基本培养基，每升基本培养基中分别加入蔗糖15g，琼脂4.6g，IAA0.1mg，青霉素50mg，并调节其PH值为5.8后，进行无菌接种，接种完毕后，培养温度为25～28℃，湿度85％以上，光照强度为2500～3500lux，光源为LED灯，光照培养16小时，黑暗培养8小时。本发明可实现同时增殖多个品种，包括赤霞珠、梅鹿辄、霞多丽和黑比诺等品种；培养周期短，经过20～30天的培养，即可进行驯化移栽；根系发达，有利于驯化移栽，提高成活率。CN107018898ACN107018898A权利要求书1/1页1.一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、按培养基配方分别配制50倍大量元素母液，100倍微量元素、铁盐、有机物、IAA和青霉素母液，其中钙盐与大量元素母液分开配制，并贴上标签，冷藏保存待用；S2、在搪瓷盆中分别加入75g蔗糖、23g琼脂，然后再加入蒸馏水4L，加热至沸腾，期间不断搅拌；S3、加入母液至搪瓷盆中，充分混合均匀，煮沸3分～5分钟后，加蒸馏水定容至5L，然后用1.0mol/L的HCl或者1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至5.8；S4、将制作好的培养基均匀的分装到200ml的组培瓶中、拧紧封口盖或者150ml的三角瓶中、加棉塞、牛皮纸包裹、用棉线绳扎紧；然后放在高压灭菌锅内灭菌，条件为121℃，20分钟；取出放在推车中待用；S5、在无菌接种室内，选用无菌培养的成株无毒苗，剪取茎段，要求茎段带有一个芽，茎段下部不能少于0.5cm，茎段上带有1～2片完整叶片，接种在上述培养基上，每瓶3～5个茎段；培养温度为25～28℃，湿度85％以上，光照强度为2500～3500lux，光源为LED灯，光照培养16小时，黑暗培养8小时。2CN107018898A说明书1/3页一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法技术领域[0001]本发明涉及组织培养技术领域，具体涉及一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法。背景技术[0002]葡萄良种苗木繁育体系建设，是我国当前葡萄产业中的突出问题。长期以来，葡萄苗木生产、销售和运输缺乏管理部门的有效监督，加之利益的驱使，导致苗木质量参差不齐，尤其是品种纯正、高质量、脱毒良种苗木生产缺乏统一标准。近年来，植物的组织培养广泛应用在酿酒葡萄快速繁殖中，通过组织培养，不仅可以加快繁殖速度，而且还可以有效地去除病毒，获得无病毒苗木。同时，酿酒葡萄外植体类型、培养基、温度与湿度、光照强度以及接种操作等内外因素都会影响组培苗的生长和繁殖速度；另外，在实际生产中，不同酿酒葡萄品种需要不同培养基来进行培养。因此，有必要针对不同酿酒葡萄品种筛选最适宜的培养条件，降低操作难度，建立酿酒葡萄组培快繁体系，为生产快速提供优质苗木。发明内容[0003]针对酿酒葡萄组培苗生产过程中，不同品种需要不同培养基配方、培养周期长、根系弱和操作难度等问题，本发明提供了一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法，可实现同时增殖多个品种、缩短培养周期、高效率的组培快繁，为生产提供优质葡萄苗木。[0004]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：[0005]一种酿酒葡萄组培苗快速繁殖的方法，包括如下步骤：[0006]S1、按培养基配方分别配制50倍大量元素母液，100倍微量元素、铁盐、有机物、IAA和青霉素母液，其中钙盐与大量元素母液分开配制，并贴上标签，冷藏保存待用；[0007]S2、在搪瓷盆中分别加入75g蔗糖、23g琼脂，然后再加入蒸馏水4L，加热至沸腾，期间不断搅拌；[0008]S3、加入母液至搪瓷盆中，充分混合均匀，煮沸3分～5分钟后，加蒸馏水定容至5L，然后用1.0mol/L的HCl或者1.0mol/L的NaOH溶液调节pH值至5.8；[0009]S4、将制作好的培养基均匀的分装到200ml的组培瓶中、拧紧封口盖或者150ml的三角瓶中、加棉塞、牛皮纸包裹、用棉线绳扎紧；然后放在高压灭菌锅内灭菌，条件为121℃，20分钟；取出放在推车中待用；[0010]S5、在无菌接种室内，选用无菌培养的成株无毒苗，剪取茎段，要求茎段带有一个芽，茎段下部不能少于0.5cm，茎段上带有