一种脐带间充质干细胞无血清培养基及其制备方法和用途.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106635978A(43)申请公布日2017.05.10(21)申请号201611186185.5(22)申请日2016.12.21(71)申请人广东科玮生物技术股份有限公司地址510730广东省广州市保税区保盈大道39号301、401房(72)发明人陈松彬倪彦艳廖丽影(51)Int.Cl.C12N5/0775(2010.01)权利要求书1页说明书7页附图2页(54)发明名称一种脐带间充质干细胞无血清培养基及其制备方法和用途(57)摘要本发明提供了一种脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：包括DMEM低糖培养基，还包括转铁蛋白、血清白蛋白、胰岛素、血小板衍生生长因子、表皮生长因子、转化生长因子、β-巯基乙醇、二氢杨梅素和儿茶素。本发明属于干细胞培养技术领域，本发明提供的脐带间充质干细胞无血清培养基可显著提高脐带间充质干细胞的贴壁性能和增殖速率，利于脐带间充质干细胞的增殖和干细胞特性保持，成脂和成骨诱导分化潜能佳，培养基的成分较简单，成本较低。CN106635978ACN106635978A权利要求书1/1页1.一种脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：包括DMEM低糖培养基，还包括转铁蛋白、血清白蛋白、胰岛素、血小板衍生生长因子、表皮生长因子、转化生长因子、β-巯基乙醇、二氢杨梅素和儿茶素。2.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述转铁蛋白的浓度为10～50μg/mL，所述血清白蛋白的浓度为0.5～5mg/mL，所述胰岛素的浓度为10～50μg/mL，所述血小板衍生生长因子的浓度为10～50ng/mL，所述表皮生长因子的浓度为10～50ng/mL，所述转化生长因子的浓度为10～50ng/mL，所述β-巯基乙醇的浓度为1～20μg/mL，所述二氢杨梅素的浓度为10～50μg/mL，所述儿茶素的浓度为1～20μg/mL。3.根据权利要求2所述的脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述转铁蛋白的浓度为20～40μg/mL，所述血清白蛋白的浓度为1～3mg/mL，所述胰岛素的浓度为15～30μg/mL，所述血小板衍生生长因子的浓度为15～30ng/mL，所述表皮生长因子的浓度为15～30ng/mL，所述转化生长因子的浓度为15～30ng/mL，所述β-巯基乙醇的浓度为5～15μg/mL，所述二氢杨梅素的浓度为15～30μg/mL，所述儿茶素的浓度为5～15μg/mL。4.根据权利要求3所述的脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述转铁蛋白的浓度为25μg/mL，所述血清白蛋白的浓度为2mg/mL，所述胰岛素的浓度为25μg/mL，所述血小板衍生生长因子的浓度为25ng/mL，所述表皮生长因子的浓度为25ng/mL，所述转化生长因子的浓度为25ng/mL，所述β-巯基乙醇的浓度为10μg/mL，所述二氢杨梅素的浓度为25μg/mL，所述儿茶素的浓度为10μg/mL。5.根据权利要求1至4中任一项所述的脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：所述胰岛素为重组胰岛素，所述血小板衍生生长因子为PDGF-BB，所述转化生长因子为转化生长因子-β1。6.根据权利要求1至4中任一项所述的脐带间充质干细胞无血清培养基，其特征在于：还包括青霉素和/或链霉素。7.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞无血清培养基的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：取DMEM低糖培养基，加入转铁蛋白、血清白蛋白、胰岛素、血小板衍生生长因子、表皮生长因子、转化生长因子、β-巯基乙醇、二氢杨梅素和儿茶素，搅拌均匀，经滤膜过滤除菌，得到脐带间充质干细胞的无血清培养基。8.根据权利要求7所述的脐带间充质干细胞无血清培养基的制备方法，其特征在于：还包括加入青霉素和/或链霉素的步骤。9.根据权利要求1至8中任一项所述的脐带间充质干细胞无血清培养基在脐带间充质干细胞培养中的用途。2CN106635978A说明书1/7页一种脐带间充质干细胞无血清培养基及其制备方法和用途技术领域[0001]本发明属于干细胞培养技术领域，具体涉及一种脐带间充质干细胞的无血清培养液及其制备方法和用途。背景技术[0002]人脐带间充质干细胞(humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hUCMSCs)来源于脐带华尔氏通胶，可在不同生长因子的调节下分化成来源于3个胚层的不同组织细胞类型。人脐带间充质干细胞具有取材方便，来源广泛，无伦理学限制等优势，不表达主要组织相容性II类抗原，微量表达主要组织相容性I类抗原，免疫原性低，移植排斥作用小，而且具有免疫调节功效，移植后的人脐带间充质干细胞分泌的营养因子，具有促血管生成、促细胞生长、抗炎症和抗纤维化等作用。