一种融合蛋白及其制备方法和其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108623692A(43)申请公布日2018.10.09(21)申请号201710165059.XA61P37/02(2006.01)(22)申请日2017.03.20A61P29/00(2006.01)A61P27/02(2006.01)(71)申请人徐寒梅A61P9/10(2006.01)地址211198江苏省南京市江宁区龙眠大A61P17/06(2006.01)道芝兰路18号5号楼504A61P19/02(2006.01)(72)发明人徐寒梅A61P19/08(2006.01)(74)专利代理机构南京知识律师事务所32207A61P3/10(2006.01)代理人蒋海军A61P27/06(2006.01)(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)A61K39/395(2006.01)A61K38/16(2006.01)A61K38/08(2006.01)A61P35/00(2006.01)权利要求书1页说明书36页序列表16页附图3页(54)发明名称一种融合蛋白及其制备方法和其应用(57)摘要本发明公开了一种融合蛋白及其制备方法和其应用，属于生物制药技术领域。本发明的融合蛋白具有抗肿瘤、自身免疫性疾病及抗炎、治疗眼科疾病的功能。本发明的长效、多功能融合蛋白采用一种柔性的Linker将EDSM-Y或者EDSM-X多肽与抗体免疫球蛋白Fc片段融合分别得到融合蛋白Ⅰ-Ⅴ，能提高药效，延长半衰期，增强稳定性，并且具有作用效果强，毒性小等特点，可用于实体肿瘤和各类炎症及新生血管类眼科疾病的预防和治疗，结构具体包括：一种血管生成抑制多肽通过其中间的氨基酸链接Linker与免疫球蛋白的Fc相关片段融合，该融合蛋白通过基因工程的方法在原核细胞或者真核细胞表达，其表达的融合蛋白通过亲和层析纯化获得。CN108623692ACN108623692A权利要求书1/1页1.一种融合蛋白，其特征在于：其含有整合素αvβ3配体序列、血管抑制多肽序列及抗体IgG1或IgG2或IgG4或HyFc的Fc序列。2.根据权利要求1所述的一种融合蛋白，其特征在于：所述的系列融合蛋白的氨基酸序列分别为SEQIDNO.15、SEQIDNO.17、SEQIDNO.19、SEQIDNO.21、SEQIDNO.23，其中构成氨基酸序列SEQIDNO.15、SEQIDNO.17、SEQIDNO.19的血管抑制多肽序列与抗体序列之间通过柔性氨基酸Linker连接。3.编码权利要求1或2所述的融合蛋白的基因，其特征在于：编码序列SEQIDNO.15、SEQIDNO.17、SEQIDNO.19、SEQIDNO.21、SEQIDNO.23的核酸序列依次分别为SEQIDNO.16、SEQIDNO.18、SEQIDNO.20、SEQIDNO.22、SEQIDNO.24。4.权利要求1或2中所述的融合蛋白在制备治疗肿瘤、自身免疫性疾病及炎症和眼科疾病的药物中的应用。5.根据权利要求4所述的融合蛋白在制备治疗肿瘤、自身免疫性疾病及炎症和眼科疾病的药物中的应用，其特征在于：所述的肿瘤包括胃癌、肺癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、胶质瘤、黑色素瘤和宫颈癌以及起源于人的头颈部、脑部、甲状腺、食管、胰腺、肺脏、肝脏、胃、乳腺、肾脏、胆囊、结肠或直肠、卵巢、子宫颈、子宫、前列腺、膀胱、睾丸的原发或继发的癌、黑色素瘤以及肉瘤。6.根据权利要求4所述的融合蛋白在制备治疗肿瘤、自身免疫性疾病及炎症和眼科疾病的药物中的应用，其特征在于：所述的炎症包括类风湿关节炎、骨关节炎、痛风性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病关节炎、反应性关节炎、感染性关节炎和创伤性关节炎；所述的自身免疫性疾病包括红斑狼疮、银屑病。7.根据权利要求4所述的融合蛋白在制备治疗肿瘤、自身免疫性疾病及炎症和眼科疾病的药物中的应用，其特征在于：眼科疾病包括虹膜新生血管性眼病、脉络膜新生血管性眼病、视网膜新生血管性眼病或角膜新生血管性眼病。8.根据权利要求7所述的融合蛋白在制备治疗肿瘤、自身免疫性疾病及炎症和眼科疾病的药物中的应用，其特征在于：所述的虹膜新生血管性眼病包括新生血管性青光眼、糖尿病视网膜病变或视网膜中央静脉栓塞引起的虹膜新生血管性眼病；所述的脉络膜新生血管性眼病包括年龄相关性黄斑变性、中心性渗出性视网膜脉络炎、眼组织胞浆菌病综合征或葡行性脉络膜病变脉络膜新生血管性眼病；所述的视网膜新生血管性眼病包括糖尿病、肿瘤、视网膜脱落、视网膜中央静脉阻塞、视网膜静脉周围炎、全身性红斑狼疮、Eales病或Coat病相关的视网膜新生血管性眼病；所述的角膜新生血管性眼病包括角膜接触镜所致角膜新生血管性疾病，以及碱及其他化学物质烧伤、