一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN105838765A(43)申请公布日2016.08.10(21)申请号201610311391.8(22)申请日2016.05.11(71)申请人陕西科技大学地址710021陕西省西安市未央区大学园1号(72)发明人毛跟年周亚丽贺磊曹晴许牡丹(74)专利代理机构西安通大专利代理有限责任公司61200代理人安彦彦(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法(57)摘要一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白质制备ACE抑制肽的方法，以魔芋蛋白质为原料，利用菠萝蛋白酶进行酶解，在一定酶解条件下酶解一段时间，经过灭酶、冷却、调节pH值、离心得到酶解液，酶解液通过超滤、SephadexG-25凝胶层析、RT-HPLC分离纯化后，得到高纯度ACE抑制肽液，经冷冻干燥得到魔芋ACE抑制肽粉末。本发明对实现魔芋飞粉有效利用，生产其高附加值产品具有重要意义。CN105838765ACN105838765A权利要求书1/1页1.一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将魔芋蛋白溶液pH值调节为4～9后，加入菠萝蛋白酶进行酶解反应，得到酶解液；(2)将酶解液灭酶后调节pH值至魔芋蛋白等电点，然后离心，收集上清液，上清液为ACE抑制肽。2.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)中魔芋蛋白溶液的质量分数为1～5％。3.根据权利要求2所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，每克魔芋蛋白溶液中加入的菠萝蛋白酶的量为3000～5000U。4.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)pH值是采用1.0moL/LNaOH溶液调节的。5.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)酶解温度为40～70℃，酶解时间为1～6h。6.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述步骤(2)中灭酶具体是在100℃下保温至少10min。7.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，所述步骤(2)中离心的转速为9000～10000r/min，时间为10～20min。8.根据权利要求1所述的一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，其特征在于，将步骤(2)中上清液经过超滤、SephadexG-25凝胶层析、RT-HPLC分离，再经冷冻干燥，得到魔芋ACE抑制肽粉末。2CN105838765A说明书1/4页一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法技术领域[0001]本发明属于ACE抑制肽制备领域，具体涉及一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法。背景技术[0002]全国年产魔芋飞粉1500～2000吨。魔芋飞粉含蛋白质20％左右，目前对魔芋的利用主要集中于魔芋精粉(葡甘聚糖)，而魔芋飞粉大多以低价作为饲料或干燥剂出售，利用价值低。[0003]高血压是一种以动脉血压持续升高为主要表现的慢性疾病，常引起心、脑、肾等重要器官的病变并出现相应的后果。高血压患者一般需要长期服用降血压药物，这可能会导致出现咳嗽、肾功能减退、蛋白尿、肝功能异常、血管神经性水肿等不良反应。因此天然、有效、无副作用、可长期服用的ACE抑制肽成为高血压药物方面研究的热点。[0004]自1965年首次发现ACE抑制肽以来，国内外研究人员已从不同来源的蛋白质中制备出各种具有血管紧张素转化酶抑制活性的肽类物质。ACE抑制肽是指血管紧张素转化酶抑制剂。ACE抑制肽对ACE活性区域结合能力较强，共同特点是与ACE活性部位的锌离子结合的能力比AngI或缓激肽更强，而且结合之后不易从ACE结合区域释放，从而阻碍ACE催化AngI水解成AngⅡ以及催化舒缓激肽水解成为失活片段的两个过程，起到降血压的作用。[0005]因此，利用魔芋飞粉生产高附加值产品，一方面拓宽了ACE抑制肽的来源，另一方面更好的开发利用魔芋飞粉。发明内容[0006]本发明的目的在于提供一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，该方法通过对魔芋飞粉进行处理，能够得到ACE抑制肽，提高了魔芋飞粉的附加值。[0007]为实现上述目的，本发明通过以下技术方案实现：[0008]一种菠萝蛋白酶酶解魔芋蛋白制备ACE抑制肽的方法，包括以下步骤：[0009](1)将魔芋蛋白溶液pH值调节为4～9后，加入菠萝蛋白酶进行酶解反应，得到酶解液；[0010](2)将酶解液灭酶后