地涌金莲植株的组培快繁方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN101940163A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN101940163A(43)申请公布日2011.01.12(21)申请号201010505216.5(22)申请日2010.10.13(71)申请人中国林业科学研究院资源昆虫研究所地址650224云南省昆明市盘龙区白龙寺(72)发明人刘秀贤李正红马宏万友名(74)专利代理机构昆明正原专利代理有限责任公司53100代理人徐玲菊(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书2页说明书4页(54)发明名称地涌金莲植株的组培快繁方法(57)摘要本发明提供一种地涌金莲植株的组培快繁方法，它以即将开放的花序为外植体，接入诱导培养基中诱导培养愈伤组织，之后接种于不定芽分化培养基中培养分化出芽，将分化芽切成带适量基盘组织的单芽，接种于增殖培养基中培养得丛生芽，将丛生芽分切成单株，接种于生根培养基中，培养成生根苗，经炼苗得移栽苗。不仅取材容易、方便，而且外植体数量众多，一个花序可取数百个外植体，同时被苞片紧紧包裹的花序不带病菌，因为病菌很难浸入到其中，因此清洗、消毒灭菌非常方便，经特配的诱导培养基、不定芽分化培养基、增殖培养基、生根培养基的依次培养，即获得健康移栽苗，移栽后成活率高达90％以上，完全能够满足市场对地涌金莲的需求量。CN109463ACCNN110194016301940166A权利要求书1/2页1.一种地涌金莲植株的组培快繁方法，其特征在于经过下列步骤：A、将消毒灭菌的外植体接入下列愈伤组织诱导培养基中：改良MS6-BA1.0～6.0mg/LNAA1.0～6.0mg/L蔗糖20～40g/L于20～30℃黑暗条件下，培养诱导愈伤组织30～50天，诱导出愈伤组织；B、将A步骤诱导出的愈伤组织接种于下列不定芽分化培养基中：改良MS6-BA0.0～3.0mg/LNAA0.0～0.04mg/L蔗糖20～40g/L在温度为20～30℃，光照时间为8～12h/d，光照强度为30～50μmol/m2·s的条件下，进行不定芽分化培养30～40天，得分化芽；未分化的愈伤组织再转入新的与上述不定芽分化培养基相同的培养基中转培养；C、将B步骤的分化芽切成带适量基盘组织的单芽，接种于下列增殖培养基中：改良MS6-BA1.0～5.0mg/LNAA0.1～0.5mg/L蔗糖20～40g/L在温度为20～30℃，光照时间为8～12h/d，光照强度为30～50μmol/m2·s的条件下，增殖培养20～40天，再转入新的与上述增殖培养基相同的培养基中，按相同培养条件转培养一次，得丛生芽；D、将C步骤增殖培养的丛生芽分切成单株，接种于下列生根培养基中：1/4改良MSIBA0.2～1.0mg/L蔗糖10～30g/L在温度为20～30℃，光照时间为8～12h/d，光照强度为30～50μmo/m2·s的条件下培养15～25天，得生根苗；E、将D步骤的生根苗移至湿度为70～85％的炼苗棚中，揭盖炼苗3～5天，取出生根苗，洗去根部培养基，移栽到消毒营养袋中，于湿度为70～85％的条件下培养1周后，得移栽苗。2.根据权利要求1所述的地涌金莲植株的组培快繁方法，其特征在于所述A步骤的消毒灭菌的外植体是：将田间即将开放的花序切下，剥去外层苞片，先用质量浓度为0.2～2％的次氯酸钠溶液浸泡5～15分钟，无菌水冲洗3～5次，再用质量浓度为0.1～1％的升汞溶液浸泡5～20分钟，无菌水冲洗4～8次，无菌滤纸吸干表面水分，即得消毒灭菌的外植体。3.根据权利要求1所述的地涌金莲植株的组培快繁方法，其特征在于所述B步骤的不定芽分化培养的转接为每30～40天转接一次，并控制分化率小于10％。2CCNN110194016301940166A权利要求书2/2页4.根据权利要求1所述的地涌金莲植株的组培快繁方法，其特征在于所述E步骤的消毒营养袋，是指经800～1000倍甲基托布津消毒的营养袋。3CCNN110194016301940166A说明书1/4页地涌金莲植株的组培快繁方法技术领域[0001]本发明涉及一种植物的组培快繁方法，尤其是地涌金莲植株的组培快繁方法，属于植物组织培养技术领域。背景技术[0002]地涌金莲(Musellalasiocarpa)又名地金莲、地涌莲、地母金莲，是芭蕉科(Musaceae)地涌金莲属具根状茎的多年生大型丛生草本植物，为中国特有单属种，主要分布于云南中部和西部海拔1500～2500米的山间坡地，四川省临近云南的部分地区也有少量分布。其花形奇特，花色鲜艳，观赏期长达200多天，是极富观赏价值和地方特色的珍稀花卉；同时还具有药用、食用、饲料、纺织和水土保持等多方面的作用。现有的地涌金莲组织培养方法，均以吸芽为外植体，并经过诱导不定芽的分化、增殖