一种穿心莲内酯有关物质的测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN102809625102809625B(45)授权公告日2015.02.04(21)申请号201210301308.031卷(第2期),228-230.(22)申请日2012.08.23邓贵华等.穿心莲药材及其制剂中6个内酯类成分的含量分析.《药物分析杂志》.2011,第(73)专利权人神威药业集团有限公司31卷(第2期),231-235.地址051430河北省石家庄市栾城县城南口审查员吕静(72)发明人巴晓雨郝福胡向青(74)专利代理机构石家庄国域专利商标事务所有限公司13112代理人白海静(51)Int.Cl.G01N30/88(2006.01)(56)对比文件US2009/0117209A1,2009.05.07,全文.US2010/0047339A1,2010.02.25,全文.国家药典委员会.双嘧达莫、头孢克洛药品标准.《中华人民共和国药典2000版二部》.化学工业出版社,2000,77、175.蓝晓玉等.HPLC法同时测定清火栀麦片中3种有效成分的含量.《药物分析杂志》.2011,第权权利要求书1页利要求书1页说明书6页说明书6页附图2页附图2页(54)发明名称一种穿心莲内酯有关物质的测定方法(57)摘要一种穿心莲内酯有关物质的测定方法，采用HPLC测定，选用十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱，以水为流动相A，乙腈为流动相B，甲醇为流动相C进行梯度洗脱；流速为1mL/min，检测波长为200~260nm，柱温为25~40℃，梯度1流动相的体积比为：A:B:C=60~75%:25~35%:0~5%，梯度2流动相的体积比为：A:B:C=55~70%:25~35%:5~10%。本发明操作简便、稳定性好，能够快速、准确地测定穿心莲内酯原料及其制剂的有关物质含量。CN102809625BCN1028965BCN102809625B权利要求书1/1页1.一种穿心莲内酯有关物质的测定方法，其特征在于包括以下步骤：（a）称取穿心莲内酯对照品，加甲醇配制成穿心莲内酯含量为10μg/mL的对照品溶液；称取穿心莲内酯原料或穿心莲内酯制剂，加甲醇配制成供试品溶液，所述供试品溶液中穿心莲内酯含量为对照品溶液中穿心莲内酯含量的100倍；（b）采用HPLC分别测定a步骤中的对照品溶液和供试品溶液，色谱条件如下：选用填料为十八烷基键合硅胶，颗粒度为5μm，颗粒平均直径为4.6mm的C18色谱柱，以水为流动相A，乙腈为流动相B，甲醇为流动相C进行梯度洗脱；流速为1mL/min，检测波长为224nm，柱温为30℃，梯度1流动相的体积比为A:B:C=70%:30%:0%，进样18min后流动相变化为梯度2；梯度2流动相的体积比为A:B:C=65%:30%:5%，其运行时间为50~55min，两次或多次测定时间间隔15~20min，洗脱至无杂质峰出现；（c）对比b步骤中测得的对照品溶液和供试品溶液的色谱图，供试品溶液中单个杂质峰的面积＜对照品溶液色谱图中穿心莲内酯峰面积的一半，供试品溶液中杂质峰的面积和＜对照品溶液色谱图中穿心莲内酯峰的面积。2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述进样是采用仪器自动进样，进样量为10uL。2CN102809625B说明书1/6页一种穿心莲内酯有关物质的测定方法技术领域[0001]本发明涉及分析化学技术领域，尤其是一种穿心莲内酯有关物质的测定方法。背景技术[0002]穿心莲内酯（Andrographolide，AND）别名穿心莲乙素，系自爵床科植物穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，其结构式如下：[0003]。[0004]穿心莲内酯是穿心莲的重要提取物和有效活性成份，具有清热解毒、凉血消肿等功能。现在已上市的或处于开发阶段的穿心莲内酯制剂主要有穿心莲内酯片、穿心莲内酯胶囊和穿心莲内酯注射剂。穿心莲内酯是以穿心莲叶为原料，采用不同的提取工艺制备得到的制剂原料药。其可用于制备各种穿心莲内酯制剂。穿心莲内酯具有酯类结构，在水溶液中，特别是高温、强碱性环境中，易水解、开环、异构化、树脂化。由于穿心莲内酯本身化学结构的不稳定性，穿心莲内酯原料药及其制剂中除主要成分穿心莲内酯外，往往同时存在新穿心莲内酯（Neoandrographolide，NAND）、去氧穿心莲内酯（Deoxyandro-grapholide，DAND）和脱水穿心莲内酯（Dehydroandrographolide，DDAND）等二萜内酯类杂质。上述杂质和穿心莲内酯原料及制剂的制备及储运过程中可能引入的其他杂质统称为有关物质。该有关物质会对穿心莲内酯原料药和制剂的安全性和有效性产生一定的影响。因此，准确测定穿心莲内酯原料及其制剂中有关物质的含量，是正确评价穿心莲内酯原