HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107831244A(43)申请公布日2018.03.23(21)申请号201711369842.4(22)申请日2017.12.19(71)申请人广西壮族自治区梧州食品药品检验所地址543000广西壮族自治区梧州市万秀区西环路中段198号(72)发明人张云平陈启钊梁剑锋(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书2页(54)发明名称HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法(57)摘要本发明公开了一种HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立穿心莲内酯标准曲线；(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得穿心莲内酯含量；所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，AgilentEclipseXDB-C18色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL·min-1；检测双波长：225nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。CN107831244ACN107831244A权利要求书1/1页1.一种HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，其特征是，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立穿心莲内酯标准曲线；(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得穿心莲内酯含量；所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，AgilentEclipseXDB-C18色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL·min-1；检测双波长：225nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。2.根据权利要求1所述的HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，其特征是，所述步骤(1)中，取穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含穿心莲内酯16.6μg.mL-1的对照品溶液。3.根据权利要求1所述的HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，其特征是，所述步骤(2)中，精密称定穿心莲片样品粉末0.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10mL，加在中性氧化铝柱上，用乙醇20mL洗脱，收集洗脱液，置50mL量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得待测样品溶液。2CN107831244A说明书1/2页HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法技术领域[0001]本发明涉及测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法。背景技术[0002]穿心莲片含穿心莲提取物，具清热解毒、凉血消肿之功效。临床用于邪毒内盛、感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤等。发明内容[0003]本发明的目的旨在提供一种HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法。[0004]本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定穿心莲片中穿心莲内酯含量的方法，包括以下步骤：[0005](1)制备对照品溶液：取穿心莲内酯对照品与乙醇制成对照品溶液；[0006](2)制备待测样品溶液：精密取穿心莲片样品加乙醇稀释，制得待测样品溶液；[0007](3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立穿心莲内酯标准曲线；[0008](4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得穿心莲内酯的峰面积，从而根据标准曲线获得穿心莲内酯含量；[0009]所述步骤(3)和(4)的色谱条件：4.6mm×150mm，5μm，AgilentEclipseXDB-C18色谱柱；流动相：乙醇-水＝65:35；流速：1.0mL·min-1；检测双波长：225nm，进样量：10μL，柱温：室温，分离度：1.6，理论板数按脱水穿心莲内酯计大于2000。[0010]所述步骤(1)中，取穿心莲内酯对照品适量，加乙醇制成含穿心莲内酯16.6μg.mL-1的对照品溶液。[0011]所述步骤(2)中，精密称定穿心莲片样品粉末0.05g，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇25mL，密塞，称定重量，浸泡1小时，超