一种同时测定穿心莲内酯多种有关物质的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106990198A(43)申请公布日2017.07.28(21)申请号201710286299.5(22)申请日2017.04.27(71)申请人沈阳药科大学地址110016辽宁省沈阳市沈河区文化路103号申请人河北神威药业有限公司(72)发明人邓意辉林湘云康乐刘欣荣宋艳志熊雁张纲李志刚(51)Int.Cl.G01N30/74(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/86(2006.01)权利要求书1页说明书8页附图5页(54)发明名称一种同时测定穿心莲内酯多种有关物质的方法(57)摘要本发明涉及分析化学技术领域，尤其是一种同时测定穿心莲内酯多种有关物质的方法。采用HPLC测定，以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱，填料粒径为2～5μm，颗粒平均直径为4.6mm，检测波长为220～230nm，柱温为30～35℃流速为0.5～2.0mL/min，进样量为10～15μL。以水(A)-乙腈(B)为流动相，进行梯度洗脱。本发明操作简便，能够快速、有效、准确地测定穿心莲内酯的多种有关物质的含量。CN106990198ACN106990198A权利要求书1/1页1.一种采用高效液相色谱法同时测定穿心莲内酯的多种有关物质的方法，其特征在于采用的色谱条件为：固定相是以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；流动相A是水，流动相B是乙腈；进行梯度洗脱，梯度条件为：梯度1流动相的体积比为：A：B＝75～80％：25～20％，进样15～20min后流动相变化为梯度2，梯度2流动相的体积比为：A：B＝65～70％：35～30％，总运行时间为45～55min；检测波长220～230nm，柱温为30～35℃；洗脱流速为0.5～2.0mL/min。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的梯度1流动相的体积比为：A：B＝77：23。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述的梯度2流动相的体积比为：70：30。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述检测波长为224nm。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述洗脱流速为1.0mL/min。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于样品检测过程中，样品进样量为10～15μL。7.根据权利要求1～6任意一项所述的方法，其特征在于在所述总运行时间45～55min后，再在梯度1条件下运行10～15min。8.根据权利要求1～6任意一项所述的方法，其特征在于所述色谱柱的填料的粒径为2～5μm；颗粒平均直径为4.6mm。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述填料的粒径为3μm。10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于所述方法包括穿心莲内酯对照品及待测样品的配制程，在配制过程中选用良溶剂对穿心莲内酯进行溶解，所述良溶剂是甲醇或乙腈，或二者混合物。2CN106990198A说明书1/8页一种同时测定穿心莲内酯多种有关物质的方法技术领域[0001]本发明涉及分析化学技术领域，更具体地说，本发明涉及一种同时测定穿心莲内酯中多种有关物质的方法。背景技术[0002]穿心莲内酯(Andrographolide)系自爵床科穿心莲属植物穿心莲中提取得到的二萜内酯类化合物，具有清热解毒、凉血消肿等功能。现已上市的或处于开发阶段的制剂主要有穿心莲内酯片剂、胶囊、注射剂等。穿心莲內酯是以穿心莲叶为原料，采用不同的提取工艺制备得到的制剂原料药。由于其酯类结构，在水溶液中，特别是高温、强碱性环境中，易水解、开环、异构化和树脂化。穿心莲内酯原料药及其制剂中除主要成分穿心莲内酯外，一般同时存在新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯等二萜内酯类杂质。这些化合物有些是在提取过程中引入的，也有通过降解或内部转化而成。这些杂质可能会影响穿心莲内酯的药效，严重可能导致不良反应，这对于药品的安全性、有效性、质量可控性都是极为不利的。因此，准确测定穿心莲内酯原料及其制剂中有关物质的含量，是评价穿心莲内酯原料药及其制剂质量的重要指标。[0003]目前，对于穿心莲内酯有关物质检测方法的研究较少。文献“穿心莲药材及其制剂中6个内酯类成分的含量分析(药物分析杂志，邓贵华，林朝展，祝晨蔯，2011(2):231-235.)”提供了一种检测穿心莲多种成分的方法，但该法洗脱梯度程序较多，且检测指标仅限于內酯类杂质的检测，且检测时间较长；专利“一种穿心莲内酯有关物质的测定方法”(CN102809625B)，采用了水-乙腈-甲醇三元体系，体系较为复杂，操作繁琐，且其检测的也只是新穿心莲內酯、去氧穿心莲內酯和脱水穿心莲內酯等內酯类分子结构，但是对于其他含量较低但可能影响产品质量安全的其他杂质，没有证据表明也可以同时检测。文献“一测多评法测定穿心莲中5个内酯类成分的