一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103385167A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103385167103385167A(43)申请公布日2013.11.13(21)申请号201310260351.1(22)申请日2013.06.26(71)申请人浙江省农业科学院地址310021浙江省杭州市石桥路198号(72)发明人王燕陈剑平汪一婷吕永平牟豪杰陈志(74)专利代理机构杭州九洲专利事务所有限公司33101代理人陈继亮(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法(57)摘要本发明公开了一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法，包括如下步骤：1）培养基的配制，包括基本培养基和组培各阶段培养基的组分；2)子房外植体的选取及消毒；3）接种及子房培养；4）种子的成熟及萌发；5）增殖培养；6）生根培养；7）炼苗及移栽。本发明利用子房培养技术获得了宝莲灯的无菌植株，而且克服了褐化的不利影响，能够在短时间内获得大量的优质壮苗，对于宝莲灯的种质保存、杂交育种及规模化种苗生产都具有积极的指导意义。CN103385167ACN1038567ACN103385167A权利要求书1/1页1.一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：该方法包括以下几个步骤：1）、培养基的配制：（1）基本培养基：1/2MS培养基，蔗糖20～30g/L，琼脂5～9g/L，pH=4.8～5.8；（2）发育培养基：1/2MS+200～800mg/L水解酪蛋白+0.3～2.0%活性炭；（3）增殖培养基：1/2MS+2.5～1.0mMβ-巯基乙醇+0.5～2.0mg/L6-BA+0.1～1.0%活性炭；（4）生根培养基：1/2MS+2.5～1.0mMβ-巯基乙醇+0.05～0.2mg/LNAA+0.1～1.0%活性炭；2）、子房外植体的选取及消毒：选取宝莲灯子房进行消毒处理；3）、接种及子房培养：将步骤2）消毒后的宝莲灯子房在无菌条件下剖开后接种于发育培养基上进行宝莲灯子房培养；4）、种子的成熟及萌发：待步骤3）的宝莲灯子房培养成熟并萌发后小心转至基本培养基上生长成幼苗；5）、增殖培养：将步骤4）的幼苗切掉根部后转接于增殖培养基上增殖；6）、生根培养：将步骤5）获得的增殖苗转接于生根培养基上诱导生根；7）、炼苗及移栽：将步骤6）的生根苗根部的培养基洗掉后移栽至装有基质的营养钵中，炼苗6～12天后将幼苗移至温室培养。2.根据权利要求1所述的宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：在所述步骤2）中，所述的宝莲灯子房外植体直径为0.3cm。3.根据权利要求1所述的宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：在所述步骤2）中，所述的消毒处理是将宝莲灯子房远轴端的突起部分用解剖刀削平后，先用浓洗衣粉溶液浸泡后再用自来水冲洗干净，然后依次在体积比为70%的酒精、有效氯浓度为1%的次氯酸钠溶液和质量分数为0.1%的升汞中分别浸泡0.5～1min、5～10min和4～8min，最后用无菌水冲洗3～5次。4.根据权利要求1所述的宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：在所述步骤3）中，所述的宝莲灯子房培养是对剖开后的子房接种于发育培养基上行培养，并使部分子房内组织与培养基接触。5.根据权利要求1所述的宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：在所述步骤3）、4）、5）、6）中，所述的培养条件是，培养温度为23±2℃、光照强度为30～60μmol·m-2·s-1、光照时间为8～16小时/天。6.根据权利要求1所述的宝莲灯子房培养及组培快繁方法，其特征在于：在步骤7）中，所述的炼苗是先在移栽的幼苗上覆盖薄膜并遮荫并在6～12天后逐渐揭开薄膜使幼苗适应外界环境。2CN103385167A说明书1/4页一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法技术领域[0001]本发明涉及培养及组培领域，具体涉及一种宝莲灯子房培养及组培快繁方法。背景技术[0002]宝莲灯(Medinillamagnifica)为野牡丹科酸脚杆属常绿小灌木，又名美丁花、粉苞酸脚杆，原产于东南亚的热带雨林，观赏价值极高。它的叶面宽大典雅，宫灯花型新奇美丽且花期超长，果实圆润玲珑，是一种观花、叶、果俱佳的精品花卉，也是近年来最具发展潜质的时尚新葩之一。但由于宝莲灯为进口花卉品种，资源较为稀缺，使得其价格在国内市场上一直居高不下，普通消费者难以承受。目前宝莲灯的繁殖以扦插方式为主、播种繁殖为辅。扦插的后期管理技术要求偏高、而扦插成活率和繁殖系数较低；此外，在自然条件下较难获得成熟的宝莲灯种子，其播种繁殖成苗率很低。综上所述，现有的宝莲灯繁育方法均不能实现大规模的工厂化生产，难以满足快速增长的市场需求。因此，