一种通过检测叶绿素含量鉴别蜂胶与杨树胶的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102778437A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102778437A(43)申请公布日2012.11.14(21)申请号201210175857.8(22)申请日2012.05.31(71)申请人杨茂森地址741022甘肃省天水市麦积区马跑泉路55号(72)发明人杨茂森刘泊王鑫(74)专利代理机构甘肃省知识产权事务中心62100代理人鲜林(51)Int.Cl.G01N21/31(2006.01)G01N1/34(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书66页页(54)发明名称一种通过检测叶绿素含量鉴别蜂胶与杨树胶的方法(57)摘要本发明提供了一种检测叶绿素含量鉴别蜂胶与杨树胶的方法，以丙酮提取试样中的叶绿素，用乙醚分层萃取，硫酸钠溶液洗涤净化，于两处一定的波长下比色定量，进行鉴别。本发明采用极性较低的有机溶剂萃取和分离蜂胶或以杨树皮或芽为材料制成的杨树胶中的叶绿素，以分光光度法对其含量进行定量检测，分别求出蜂胶和杨树胶各自叶绿素含量的最高值和平均值，设定蜂胶叶绿素含量安全限值为15mg/100g，通过对比检测叶绿素含量可准确鉴别蜂胶和杨树胶。本发明的检测方法简便，检测样品及设备简单易得，检测准确率高。CN1027843ACN102778437A权利要求书1/1页1.一种检测叶绿素含量鉴别蜂胶与杨树胶的方法，以丙酮提取试样中的叶绿素，用乙醚分层萃取，硫酸钠溶液洗涤净化，于两处波长下比色定量，进行鉴别；具体工艺步骤如下：a、分析步骤a.1、蜂胶的炮制及提取：取毛蜂胶样品，先在-5℃～－10℃下冷冻24～48小时，然后捣碎精密称定；置于玻璃研钵中，加与样品等量的碳酸钙及石英砂，研磨，加相当两倍样品量的乙醇继续研磨成糊状；将研磨物全部转移至具塞锥形瓶中，用乙醇洗涤研钵至无色，使乙醇量达到样品量的二十倍，密塞、冷浸、振摇混匀、静置24～48小时，用G3玻璃漏斗抽滤，用丙酮水溶液洗涤抽干；将漏斗内残渣倒回研钵中加丙酮水溶液研磨，再转移至漏斗中，抽滤，继续用丙酮水溶液洗涤研钵及漏斗中的残渣，至滤液无色，使用丙酮水溶液量达到样品量的二十倍；精密吸取总抽滤液的四分之一，置于干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，在90℃～110℃温度下干燥3小时并冷却至室温，迅速精密称定重量，以干燥品计算出毛蜂胶中浸出物的含量（%）；a.2、试样的溶解：取上述干燥蜂胶提取物，精密称定，置烧杯中，加丙酮水溶液使供试品全部溶解，备用；a.3、分离净化：将上述试样溶解液全部转入内盛硫酸钠溶液的分液漏斗中，用乙醚分次洗涤烧杯，并入分液漏斗中，振摇，使分层，水层放入另一分液漏斗中，加试样溶解液五分之二的乙醚萃取，弃去水层；有机层并入第一个分液漏斗中，用水洗涤，弃去水层；将乙醚层通过装有四分之一乙醚量的无水硫酸钠的小漏斗滤入棕色容量瓶中，用试样溶解液五分之三的乙醚洗涤分液漏斗，并洗去无水硫酸钠层中的色素，定容，摇匀，待用；a.4、测定：取上述溶液到棕色容量瓶中，用乙醚定容，摇匀，立即于分光光度计上测定642nm及660nm波长处的吸光值，用乙醚作空白；a.5计算出试样中叶绿素的含量。2.根据权利要求1所述的一种蜂胶与杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述试剂为化学纯或分析纯，水为蒸馏水。3.根据权利要求1或2所述的一种蜂胶与杨树胶的鉴别方法，其特征在于所述试剂包括：乙醇、碳酸钙、石英砂：试剂级、丙酮、无水硫酸钠、乙醚、丙酮水溶液及硫酸钠水溶液中的一种。4.根据权利要求3所述的一种蜂胶与杨树胶的鉴别方法，其特征在于所述的试剂无水硫酸钠为在650℃灼烧4h的无水硫酸钠。5.根据权利要求3所述的一种蜂胶与杨树胶的鉴别方法，其特征在于所述的试剂丙酮水溶液的质量体积比为85+15，V/V。6.根据权利要求3所述的一种蜂胶与杨树胶的鉴别方法，其特征在于所述的试剂硫酸钠水溶液为2%，m/V。2CN102778437A说明书1/6页一种通过检测叶绿素含量鉴别蜂胶与杨树胶的方法技术领域[0001]本发明涉及蜂胶与杨树胶鉴别技术领域，特别是通过叶绿素含量的含量检测来鉴别蜂胶与杨树胶的一种方法。背景技术[0002]蜂胶具有降血脂、降血糖、提高人体免疫力、增强机体抵抗力、抗氧化、抗肿瘤、预防感染等多种生物学特性，被广泛地应用在人体保健和疾病治疗之中，是近年来国内外蜂产品研究和开发的热点。[0003]蜂胶是西方蜜蜂采集植物芽、叶或树皮破裂处分泌的树脂并混入蜜蜂上颚腺分泌物和蜂蜡而成的芳香固体物，被蜜蜂涂布在蜂箱的缝隙、框耳等处，经人工收集的具有天然属性的蜜蜂产品。我国天然蜂胶年产量约400吨，每公斤收购价在400元。杨树胶是人工利用杨柳科杨属植物的嫩枝、幼芽、树皮等进行熬制提取的胶体，是国内假蜂胶的主要类型，其成本价每公斤150元左