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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114878737A(43)申请公布日2022.08.09(21)申请号202210579827.7(22)申请日2022.05.26(71)申请人南京德瑞源医药科技有限公司地址210000江苏省南京市浦口区江北新区药谷大道11号生命科技岛(72)发明人徐锦忠郭琦张倩(74)专利代理机构南京求真专利代理事务所(普通合伙)32600专利代理师刘骐鸣(51)Int.Cl.G01N30/86(2006.01)G01N30/88(2006.01)G01N30/72(2006.01)G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图4页(54)发明名称一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法(57)摘要本发明提供一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,通过液相色谱‑质谱联用仪分析纯蜂胶、纯杨树胶和待鉴别的蜂胶的0‑45min的选择离子色谱图;对比纯蜂胶、纯杨树胶和待鉴别的蜂胶的选择离子色谱图,确定不同的选择离子在不同的时间段通过同分异构体的指纹图谱以确定纯蜂胶和掺入10%以上杨树胶的蜂胶的鉴别。运用HPLC法来分离,质谱选择离子指纹图谱进行比对鉴定,方法的选择性更高,抗干扰能力强。通过对比同分异构体的指纹图谱,图谱简洁明了,结果更准确可靠。样品处理简单,液相分离也在45min完成,缩短了分析时间。以样品中存在同系物作为参照,信号的相对强弱可以直接反映样品中组分的相对含量,对于掺入10%杨树胶的样品都能检测鉴别,准确性高。CN114878737ACN114878737A权利要求书1/1页1.一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:包括如下步骤:步骤一,通过液相色谱‑质谱联用仪分析纯蜂胶、纯杨树胶和待鉴别的蜂胶的0‑45min的选择离子色谱图;步骤二,对比纯蜂胶、纯杨树胶和待鉴别的蜂胶的选择离子色谱图,确定不同的选择离子在不同的时间段通过同分异构体的指纹图谱以确定纯蜂胶和掺入10%以上杨树胶的蜂胶的鉴别。2.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:选择离子质荷比(m/z)为:163,179,193,207,247,253,255,269,271,283,285,301,313,367,每一个选择离子代表了一种或一类同分异构体的蜂胶中所含的组分。3.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:通过对比选择离子色谱图,确定选择离子m/z247在26‑30min时间段的三个同分异构体的指纹图谱可以用来确定纯蜂胶和对掺入10%以上杨树胶样品的鉴别。4.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:通过对比选择离子色谱图,确定选择离子m/z285在14‑16min时间段的四个同分异构体的指纹图谱可以用来确定纯蜂胶和对掺入10%以上杨树胶样品的鉴别。5.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:通过对比选择离子色谱图,确定选择离子m/z271在12‑18min时间段的两个同分异构体的指纹图谱可以用来确定纯蜂胶和对掺入10%以上杨树胶样品的鉴别。6.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:通过选择离子色谱图,确定选择离子m/z313在23‑28min时间段的两个同分异构体的指纹图谱可以用来确定纯蜂胶和对掺入10%以上杨树胶样品的鉴别。7.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:液相色谱‑质谱联用仪中,流速为:0.5‑1.0ml/min,进样量为1‑I0μl;流动相为甲醇(A)‑0.1‑0.3%、甲酸(B),梯度为:0‑3.0min35%A、6.0‑10.0min45%A、13.0‑16.0min55%A、19.0‑27.0min60%A、38.0‑41.0min95%A和42.0‑45.0min35%A。8.根据权利要求1所述的一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法,其特征在于:液相色谱‑质谱联用仪中紫外检测器选择波长为280nm;质谱喷雾条件为:ESI负离子,喷雾电压:3000V,毛细管温度为300℃,加热温度为350℃,鞘气(N2)流速50psi,辅助气(N2)流速8psi。2CN114878737A说明书1/5页一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法技术领域[0001]本发明涉及蜂胶鉴别技术领域,具体为一种杨树型蜂胶中掺入杨树胶的鉴别方法。背景技术[0002]杨树型蜂胶是蜜蜂从杨树幼芽及树杆上采集来的树脂,并混入自身上腭分泌物和蜂蜡等形成的一种具有芳香味的粘性胶状固形物质。蜂胶是传统的中药材,大量的研究和应用证明,蜂胶具有多种生理功能,其包括抗氧化,抑菌,消炎,抗病毒,抗癌、保肝及辅助治疗糖尿病等作用,特别