一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN106770763A(43)申请公布日2017.05.31(21)申请号201611188905.1(22)申请日2016.12.21(71)申请人浙江海洋大学地址316022浙江省舟山市临城新区长峙岛海大南路1号(72)发明人杨红丽叶意群林琳(74)专利代理机构宁波诚源专利事务所有限公司33102代理人袁忠卫(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法(57)摘要本发明涉及一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法，包括如下步骤：(1)将蜂胶和杨树胶分别超声溶解后，经离心过滤后，将滤液旋转蒸发至膏状，得到蜂胶提取物和杨树胶提取物；(2)将蜂胶提取物和杨树胶提取物用甲醇分别稀释成蜂胶分析液和杨树胶分析液；(3)将蜂胶分析液和杨树胶分析液分别进样到高效液相色谱-自由基检测系统联用的在线检测系统中；(4)将蜂胶的色谱图与杨树胶的色谱图进行对比，以鉴别蜂胶和杨树胶。本发明所述的鉴别方法既可以抗氧化活性组分为对照品，克服指纹图谱的重现性差的缺陷，又可避免活性组分降解，活性损失，从而导致对照品不稳定的缺陷；且该方法高效、直观，操作简便，灵敏度高，重复性好。CN106770763ACN106770763A权利要求书1/1页1.一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将蜂胶用乙醇在20℃～27℃超声溶解，随后离心，过滤后将滤液旋转蒸发至膏状，得蜂胶提取物；将杨树胶用乙醇在20℃～27℃超声溶解，随后离心，过滤后将滤液旋转蒸发至膏状，得杨树胶提取物；(2)将步骤(1)的蜂胶提取物和杨树胶提取物分别用有机溶剂配制成浓度为1mg/mL～3mg/mL的蜂胶提取物分析液和1mg/mL～3mg/mL的杨树胶提取物分析液；(3)将步骤(2)获得的蜂胶提取物分析液和杨树胶提取物分析液分别进样到高效液相色谱-自由基检测系统联用的在线检测系统中：高效液相色谱的检测条件设定：流动相A为含乙酸的甲醇，B为含乙酸的水，流速为0.6mL/min～0.9mL/min，柱温30℃～40℃；冲洗梯度为：0～20min，30％～60％A；20～25min，60％～50％A；25～35min，50％A；34～37min，50％～55％A；37～45min，55％A；45～80min，55％～85％A；80～85min，85％A；检测波长为280nm，选用shimp-packVP-ODS色谱柱；加入自由基溶液的流速为0.10mL/min～0.40mL/min，加入该溶液后在特定波长处扫描；(4)将蜂胶的色谱图与杨树胶的色谱图进行对比，以鉴别蜂胶和杨树胶。2.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(1)中超声温度为25℃。3.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中蜂胶提取物分析液和杨树胶提取物分析液的浓度均为1.60mg/mL。4.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(2)中有机溶剂为甲醇或乙醇。5.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相A中乙酸体积分数为0.05％～0.2％，流动相B中乙酸体积分数为0.05％～0.2％。6.根据权利要求4所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相A中乙酸体积分数为0.1％，流动相B中乙酸体积分数为0.1％。7.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中流动相的流速为0.80mL/min。8.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中高效液相色谱柱的柱温为35℃。9.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中加入自由基溶液的流速为0.20mL/min。10.根据权利要求1所述的蜂胶和杨树胶的鉴别方法，其特征在于：所述步骤(3)中自由基为ABTS自由基或DPPH自由基。2CN106770763A说明书1/5页一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法技术领域[0001]本发明属于食品、药品质量控制方法领域，具体涉及一种蜂胶和杨树胶的鉴别方法。背景技术[0002]蜂胶因其具有广泛的生物学活性，如抗癌，抗氧化，抗炎，抗菌和抗真菌活性，受到了人们广泛的关注，在医疗保健等领域得到了广泛的应用，然而，蜂胶的生产受到蜂种、采胶方式以及胶源情况的影响，产量相对较低，一直处于供不应求状况。因杨树芽提取物与杨树型蜂胶提取物在成分、颜色、气味上极其相似，近年来用杨树胶(杨树芽提取物)冒充蜂胶的现象屡屡发生。现行蜂胶质量控制主要针对类黄酮和多酚两大类成分，而这两类成分杨树芽提取物与杨树