1个新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103508988103508988A(43)申请公布日2014.01.15(21)申请号201210214125.5(22)申请日2012.06.27(71)申请人南开大学地址300071天津市南开区卫津路94号(72)发明人郭远强(51)Int.Cl.C07D307/94(2006.01)A61P25/00(2006.01)A61P25/28(2006.01)A61P25/16(2006.01)权利要求书1页权利要求书1页说明书4页说明书4页(54)发明名称1个新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备及其应用(57)摘要本发明属于医药技术领域，涉及1个新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备及其应用，其具有如下结构：该蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜有良好的神经保护活性，可用于中枢神经系统退行性疾病，如帕金森病(Parkinson′sdisease，PD)等疾病的预防及治疗药物的开发和应用。CN103508988ACN103589ACN103508988A权利要求书1/1页1.新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜，其特征在于，其具有如下结构：2.一种如权利要求1所述新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备方法，其特征在于：其包括如下步骤：(1)干燥的蜘蛛香(Valerianaiatamansijones)根及根茎部分粉碎后经溶剂提取法，采用95％-100％的乙醇或甲醇提取，减压回收提取液得粗提物；(2)粗提物用蒸馏水混悬得提取物混悬溶液，依次用萃取溶剂石油醚或环己烷、二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取；(3)步骤(2)所得石油醚或环己烷萃取物经硅胶柱色谱法分离，以洗脱溶剂石油醚/乙酸乙酯或石油醚/丙酮混合溶剂梯度洗脱；(4)上述步骤(3)中所得流分经半制备或制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水，乙腈/水或甲醇/乙腈/水为流动相洗脱，得到新化合物1。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：萃取溶剂与提取物混悬溶液体积比为1∶3～3∶1，萃取次数为2-5次。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：洗脱溶剂为100∶1～2∶1的石油醚/乙酸乙酯或石油醚/丙酮。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：从甲醇/水混合溶剂比例为75％、乙腈/水混合溶剂比例为68％的流分中得到化合物1。6.权利要求1所述的新蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜类化合物1有良好的神经保护活性，可用于中枢神经系统退行性疾病，如帕金森病(Parkinson′sdisease，PD)等疾病的预防及治疗药物的开发和应用。2CN103508988A说明书1/4页1个新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备及其应用技术领域[0001]本发明属于医药技术领域，涉及倍半萜类化合物分离、制备和应用，具体涉及1个新的蜂斗菜内酯(bakkenolide)型的倍半萜的制备方法及其神经保护活性的应用。背景技术[0002]帕金森病(Parkinson’sdisease，PD)，是一种常见于中老年人的中枢神经系统退行性疾病。目前对PD主要病理特征的认识为黑质致密部多巴胺能神经元进行性缺失和死亡，使黑质-纹状体通路多巴胺(dopamine，DA)释放减少，造成纹状体DA含量显著降低，从而对锥体外系的运动调节功能失调。目前治疗PD的药物仅能减轻或改善PD症状，但无法减缓、阻止或逆转PD黑质多巴胺能神经元的变性过程，多巴胺能神经元的变性，最终会导致PD的进一步恶化。因此，针对PD发病率的逐年攀升，有必要研究开发新的、高效低毒的治疗PD的药物。针对PD，通过保护多巴胺能神经元，维持其正常功能，进而促进多巴胺的分泌，有效的缓解PD症状并阻止PD进程，已成为近年来研究开发治疗PD药物的热点之一。发现具有神经保护活性的化合物，使其保护多巴胺能神经元，阻止神经元的变性(缺失、死亡)，有望于在医学上用于治疗PD。PD的病理研究揭示了，在线粒体功能异常的同时，伴随着呼吸链I的抑制，而神经毒素1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyridinium，MPP+)，可导致此抑制，即神经毒素MPP+能抑制呼吸链I导致线粒体功能失调，造成PD所具有的症状。选择人的多巴胺能神经元细胞SH-SY5Y，通过体外培养，此细胞在一定浓度的MPP+刺激时(不少于24h)，会导致明显的多巴胺能神经元损伤，用此建立的模型来寻找并发现一些新的具有神经保护活性的天然产物。在此细胞筛选模型中，在用MPP+造成多巴胺能神经元损伤时，随后加入不同浓度的化合物，通过检测活细胞数量，我们即能够知道化合