麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN107449836A(43)申请公布日2017.12.08(21)申请号201610806572.8(51)Int.Cl.(22)申请日2016.09.06G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)(71)申请人江苏出入境检验检疫局动植物与食G01N30/72(2006.01)品检测中心地址210001江苏省南京市中华路99号申请人上海出入境检验检疫局动植物与食品检验检疫中心中国检验检疫科学研究院食品安全所(72)发明人吴斌张睿丁涛邓晓军张峰刘芸费晓庆张晓燕柳菡沈伟健陈磊郭德华伊雄海何宇平(74)专利代理机构南京众联专利代理有限公司32206代理人张慧清权利要求书2页说明书6页附图2页(54)发明名称麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法(57)摘要本发明属于食品检测领域，特别是涉及一种麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法。本发明中公开的检测方法以高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱为检测手段，以3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷为特征检测标志物，可以快速、准确鉴别麦卢卡蜂蜜。该方法完整性强、专属性好、可控性强、准确性高。本发明的实施可以为麦卢卡蜂蜜的鉴别分析提供技术支撑，保护消费者合法权益，对于规范蜂产品市场及推动蜂产品事业的健康发展有着十分重要的意义。CN107449836ACN107449836A权利要求书1/2页1.麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是以高效液相色谱-四级杆静电场轨道阱高分辨质谱为检测手段，以3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷为特征检测标志物。2.根据权利要求1所述的麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是，高效液相色谱分离条件如下：色谱柱：DikmaDiamonsilPlusC18150*4.6mm色谱柱；流动相：A为0.1％(v/v)甲酸水溶液，B为乙腈；流速：0.8mL/min；梯度洗脱程序：0-2min70％A,2-12min70-10％A,12-15min10％A,15-16min10-90％A，16-18min70％A；柱温：25℃；进样体积：25μL。3.根据权利要求1所述的麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是，质谱检测选用可加热的电喷雾离子源为检测离子源，采用负离子扫描模式，毛细管温度350℃。4.根据权利要求1所述的麦卢卡蜂蜜快速鉴别检测方法，其特征是，待检测蜂蜜样品的制备方法是，先将蜂蜜溶解于水中，静置，并取上层溶液过滤膜，作为进样样品。5.根据权利要求2所述的麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是，3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷特征检测标志物色谱峰的保留时间为13.4min左右。6.根据权利要求3所述的麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是，标志物3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷的特征母离子精确质荷比为581.1703m/z，二级子离子精确质荷比为211.0603m/z和196.0370m/z。7.根据权利要求1至6中任意一项所述的麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法，其特征是，包括以下步骤：(1)以3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷标准品建立标准液相色谱图和标准质谱图；(2)以步骤(1)中的条件对待检测样品进行检测，得到待检测样品的液相色谱图和质谱图；(3)将步骤(1)和(2)获得的谱图进行对比，如果步骤(2)获得的液相色谱图中有这样一个色谱峰，它与标准品出峰时间相差在±2.5％，且质量数偏差在10ppm以内；同时在步骤(2)获得的质谱图中，在扣除背景后，存在3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷特征离子对，且其相对丰度与浓度相当标准品的相对丰度相比，其偏差在下表允许相对误差内，如果满足上述条件，则进一步进行以下步骤：(4)制备已知浓度含量的3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷的标准溶液，并以其特征离子的准确质量色谱峰峰面积为纵坐标，浓度含量为横坐标，绘制标准曲线；(5)利用步骤(4)的标准曲线，以步骤(2)得到的准确质量色谱峰峰面积计算得到待测2CN107449836A权利要求书2/2页样品中3，5-二甲氧基苯甲酸甲酯-4-双葡萄糖糖苷的浓度含量；如果测得浓度含量大于等于100mg/kg则认为待检测样品为合格麦卢卡蜂蜜；如果测得浓度含量小于100mg/kg，则认为该待检测样品为不合格麦卢卡蜂蜜。3CN107449836A说明书1/6页麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法技术领域[0001]本发明属于食品检测领域，特别是涉及一种麦卢卡蜂蜜的快速鉴别检测方法。背景技术[0002]麦卢卡蜂蜜是新西兰特有的一种珍贵蜜种，是蜜蜂采集新西兰特有的一种灌木—Manuka(Leptospermumscoparium)的花蜜酿造而成的。它区别于其