基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108872289A(43)申请公布日2018.11.23(21)申请号201810329809.7(22)申请日2018.04.13(71)申请人江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心地址210000江苏省南京市建邺区创智路39号(72)发明人吴斌刘芸丁涛沈伟健张建费晓庆陈磊陆慧媛刘艳黄娟(74)专利代理机构南京众联专利代理有限公司32206代理人张慧清(51)Int.Cl.G01N24/08(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图3页(54)发明名称基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法(57)摘要本发明属于食品安全领域，特别是麦卢卡蜂蜜鉴别领域，更为具体的说是涉及基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，该方法通过分析待检测样品的核磁共振波谱谱图数据，确定待检测样品是否为麦卢卡蜂蜜。本发明公开的基于核磁共振的麦卢卡蜂蜜鉴别方法通过特定的特征标志物，可以弥补目前掺假麦卢卡蜂蜜鉴别中存在的缺陷。该方法具有分析时间短、完整性强、专属性好、可控性强、准确性高等优点。使用本发明所公开的鉴别方法后对于麦卢卡蜂蜜中所含有的麦卢卡特征标志物成分的最低检出量为10%。CN108872289ACN108872289A权利要求书1/1页1.基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于：该方法通过分析待检测样品的核磁共振波谱谱图数据，确定待检测样品是否为麦卢卡蜂蜜，具体描述为：A.当核磁共振波谱分析图谱同时满足以下条件时，该待检测样品为麦卢卡蜂蜜：（1）含有1H化学位移δ为2.30±0.05ppm、2.38±0.05ppm的两个单峰；（2）2.30ppm处单峰高度高于2.38ppm处单峰高度，且两个单峰相对高度比大于等于2.0；（3）谱峰高度的误差范围不超过10%；B.当核磁共振波谱分析图谱不满足以上（1）-（3）中任一条件时，该待检测样品不为麦卢卡蜂蜜。2.根据权利要求1所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，核磁共振波谱的分析条件为：采用BBI探头；测定温度：室温20-35℃；环境湿度：20-35%；观察频率400MHz；采用预饱和方法压制水峰；脉冲程序为：noesygppr1d或者为zg30或者为zgpr；谱宽：6410Hz；90°脉冲宽度：pl=6.45μs；脉冲延迟时间：dl=15s；发射中心：O1=4.7；累加次数：16或者为64。3.根据权利要求1所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，核磁共振波谱分析样品制备方法为：向蜂蜜样本溶液中，加入浓度为0.5-2.0mol/L的磷酸盐缓冲溶液，两者的体积比为800-1500：100-300，涡旋振荡至均匀混合，调整溶液的pH值至2.5-4.0，取其中600μl于核磁管中。4.根据权利要求3所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，调整溶液的pH值的溶液为盐酸或氢氧化钠。5.根据权利要求4所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，盐酸或氢氧化钠的浓度为1.0mol/L。6.根据权利要求3所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，磷酸盐缓冲溶液中含体积分数为0.05-0.3%的3-三甲基硅烷基-1-丙基磺酸钠内标溶液和0.1-3.0mM的叠氮化钠。7.根据权利要求3所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，蜂蜜样本溶液的制备方法是：将融化后的蜂蜜样品，经尼龙滤布过滤，除去蜂蜜中固体杂质后，准确称取0.25g样品于离心管中，加入1mL重水，溶解完全。8.根据权利要求7所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，所述尼龙滤布的孔径为0.10mm-0.14mm。9.根据权利要求7所述的基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法，其特征在于，蜂蜜样本的融化处理步骤为：对无结晶的实验室样品，将其搅拌均匀，对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过60℃的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温。2CN108872289A说明书1/5页基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法技术领域[0001]本发明属于食品安全领域，特别是麦卢卡蜂蜜鉴别领域，更为具体的说是涉及基于核磁共振技术的麦卢卡蜂蜜鉴别方法。背景技术[0002]麦卢卡(Manuka)蜂蜜是新西兰特有的一种珍贵蜜种，是蜜蜂采集新西兰特有的一种灌木植物——Manuka(Leptospermumscoparium)的花蜜酿造而成的。由于麦卢卡蜂蜜具有独特的抗菌活性，可用于预防伤口感染，帮助伤口愈合，具有较高的药用价值，因此越来越受到我国消费者的青睐。[0003]目前，新西兰的麦卢卡蜂蜜出口近10年来每年增长10％左右，2013年，从新西兰出口的蜂蜜价值1.28亿新西兰元