一种基于氨基酸的荆条蜜鉴别方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108152413A(43)申请公布日2018.06.12(21)申请号201711388506.4(22)申请日2017.12.21(71)申请人西北大学地址710069陕西省西安市太白北路229号申请人陕西蜂产品工程技术研究中心(72)发明人曹炜孙政程妮吕新刚陈建忠(74)专利代理机构西安西达专利代理有限责任公司61202代理人谢钢(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)权利要求书1页说明书4页附图7页(54)发明名称一种基于氨基酸的荆条蜜鉴别方法(57)摘要本发明公开了一种荆条蜜氨基酸特征标识物的鉴别方法。首先通过比较不同品种蜂蜜的氨基酸特征，确定荆条蜜中的特征氨基酸，然后对全国不同省份的荆条蜜样品进行分析确定所选特征氨基酸化合物不受产地影响，最后确定荆条蜜中的苯丙氨酸为荆条蜜的特征标识物。本发明设计合理，所选分析仪器灵敏度高，可行性强，可准确鉴定荆条蜜酚类特征标识物，同时为鉴别荆条蜜真伪提供可靠依据。CN108152413ACN108152413A权利要求书1/1页1.一种荆条蜜氨基酸特征标识物的鉴别方法，其特征在于包括以下步骤：（1）选取四种常见的蜂蜜包括枣花蜜，龙眼蜜，洋槐蜜和油菜蜜作为比较；将蜂蜜样品加蒸馏水充分溶解，定容，使用watersAccq·Tag试剂盒衍生氨基酸，配制成供试样品，荆条蜜样品做相同处理；（2）使用HPLC-DAD对枣花蜜、龙眼蜜、洋槐蜜、油菜蜜和荆条蜜样品的供试溶液进行测定分析，确定荆条蜜样品的特征峰，保留时间为32.225min的色谱峰，通过与标准品对照该峰为苯丙氨酸；（3）采集全国不同省份和地区的荆条蜜样品，衍生氨基酸，方法同步骤（1）；（4）使用HPLC-DAD对全国不同省份和地区的荆条蜜样品的供试溶液进行测定分析，保留时间为32.225的色谱峰强度最大且出现在所有供试荆条蜜样品溶液中；（5）以18种氨基酸含量为变量，运用化学计量学中的聚类分析方法和判别分析对蜂蜜样品进行分析，荆条蜜可以准确的从其他样品中分离出来。2.根据权利要求1所述的荆条蜜氨基酸特征标识物的鉴别方法，其特征在于上述液相色谱条件为：色谱柱：watersAccq·Tag氨基酸分析柱，150mm×3.9mm,5µm；流动相：乙腈，超纯水和watersAccq·Tag缓冲液；流动相流速：1.0mL/min；洗脱方式：梯度洗脱；检测波长：248nm；柱温：37℃。2CN108152413A说明书1/4页一种基于氨基酸的荆条蜜鉴别方法技术领域[0001]本发明涉及一种荆条蜜氨基酸特征标记物的鉴别方法，属于食品科学领域。背景技术[0002]蜂蜜（honey）是由蜜蜂采集植物花粉和分泌物并与自身的物质相结合，在蜂巢中酿造而成的一种天然甜物质。蜂蜜中含有多种氨基酸、蛋白质、酚酸、黄酮等营养物质。蜂蜜的营养价值和感观都与花源地有密切的关系，因此不同花源蜂蜜的市场价格也有很大的不同。目前，市场上蜂蜜质量良莠不齐，有很多以次充好的情况。因此，确立不同种类蜂蜜的花源标记物对于鉴别蜂蜜种类有重大意义。[0003]荆条（vitexnegundovar.heterophylla(Franch.)Rehd）主要分布于我国北方地区，是一种耐贫瘠、耐干旱植物，是我国主要的蜜源植物之一。荆条花为淡紫色，花期为每年6-8月，荆花开放季节，每群蜂可产荆条蜜15到50公斤。荆条蜜呈半透明琥珀状，结晶细腻乳白，口感甜而不腻。富含多种矿物质和蛋白质、氨基酸、维生素、无机酸等，是理想的滋补营养品，可以止咳润肺、健胃通便、防暑清心等功效。多适合气血不足、伤风头痛、目赤、失眠者。[0004]蜂蜜中的氨基酸主要来源于蜜源植物的花粉，因此从氨基酸含量的不同可以判断蜂蜜的花源植物。目前我国对于蜂蜜中游离氨基酸的研究很少，而随着高效液相色谱（HPLC）和氨基酸衍生技术的进步为准确测定蜂蜜中的游离氨基酸提供了可靠的方法。发明内容[0005]本发明目的是提供一种荆条蜜的氨基酸特征标识物的鉴别方法。该方法使用watersAccq·Tag试剂盒衍生氨基酸，高效液相色谱串联二极管阵列检测器(HPLC−DAD)测定氨基酸含量，从而确定荆条蜜氨基酸特征标识物，为鉴别荆条蜜的真伪提供可靠依据。[0006]本发明的目的通过以下方案实现：一种荆条蜜氨基酸特征标识物的鉴别方法，包括以下步骤：（1）选取四种常见的蜂蜜包括枣花蜜，龙眼蜜，洋槐蜜和油菜蜜作为比较；将蜂蜜样品加蒸馏水充分溶解，定容，使用watersAccq·Tag试剂盒衍生氨基酸，配制成供试样品，荆条蜜样品做相同处理；（2）使用HPLC-DAD对枣花蜜、龙眼蜜、洋槐蜜、油菜蜜和荆条蜜样品的供试溶液进行测定分析，确定荆条蜜样品的特征峰，保留时间为