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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113136408A(43)申请公布日2021.07.20(21)申请号202011273130.4(22)申请日2020.11.13(71)申请人湖北工业大学地址430068湖北省武汉市洪山区南李路28号(72)发明人汪超刘雅颀尹晓清(74)专利代理机构武汉宇晨专利事务所(普通合伙)42001代理人余晓雪(51)Int.Cl.C12P21/06(2006.01)C07K1/34(2006.01)A23L33/18(2016.01)权利要求书1页说明书7页附图3页(54)发明名称一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法(57)摘要本发明涉及食品加工领域,具体公开了一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法,本发明是以牛软骨、整粒糯米酒糟、完整鲜茉莉花和果葡糖浆为原料经前期原料处理、混合、蜜蜂生物转化、分离干燥而制成的牛骨小分子活性肽。本发明所得的牛骨小分子活性肽干基纯度>91%,其中189‑1000道尔顿的牛骨小分子活性肽占总肽段质量分数的69%以上,能作为大众人群的一种功能膳食补充剂,尤其对于运动少的群体有明显的强精壮骨的功效。CN113136408ACN113136408A权利要求书1/1页1.一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法,其特征在于,其步骤如下:(1)将新鲜的牛软骨洗净,加水没过牛软骨,煮沸后除去浮渣和残油,捞出牛软骨,冷却后重复上述加水、煮沸、除浮渣和残油、捞出牛软骨的步骤至少三次;牛软骨沥干后,置于-10℃~-5℃进行缓慢冷冻,冷冻完全后再进行解冻处理,如此冷冻解冻至少三次后,收集牛软骨和牛软骨解冻液;(2)取步骤(1)收集的牛软骨,按牛软骨:水=200~250:800~1200的质量比加水混合,打浆,磨浆,剪切后,得到牛软骨混浆;然后按牛软骨混浆:完整鲜茉莉花:整粒糯米酒糟=10~12:0.6~1:0.4~0.8的质量比加入完整鲜茉莉花、整粒糯米酒糟混合,再向其中加入步骤(1)收集的牛软骨解冻液,文火常压煮沸后保持40~60min,捞出完整茉莉花和整粒糯米酒糟后,得到牛软骨液;将牛软骨液抽真空密封包装,再经132~140℃、0.22~0.25MPa高温加压条件下作用1.5~2.5小时;(3)将步骤(2)所得解聚后的牛软骨液拆包,用60目滤布过滤去除不溶性物质,收集牛骨滤液;按牛骨滤液:果葡糖浆=60~65:35~40的质量比加入果葡糖浆混合均匀得骨糖液,骨糖液经50~58℃低温浓缩至原体积的1/3~1/2,得骨糖膏;(4)将干丝瓜瓤固定在蜂箱底部,再将步骤(3)所得骨糖膏分散滴落于丝瓜瓤上使其不聚集成块,便于蜜蜂采食;待骨糖膏被蜜蜂采食完后收集蜂糖蜜;将蜂糖蜜加水稀释,用200目滤布过滤去除不溶性物质,再经滤膜分离去除包括果糖和葡萄糖在内的小分子,其主要截留分子量在189~1000道尔顿的牛骨小分子活性肽;(5)步骤(4)所得截留物经速冻、真空冷冻干燥,即得牛骨小分子活性肽。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述果葡糖浆为F42型。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述新鲜的牛软骨是以牦牛为原料生产的。4.权利要求1-3任一所述方法得到的牛骨小分子活性肽作为一种功能膳食补充剂的应用。2CN113136408A说明书1/7页一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法技术领域[0001]本发明涉及食品加工领域,具体涉及一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法。背景技术[0002]目前小分子肽的制备通常使用的手段是使用酸解或酶解的方式将蛋白质水解获得小分子肽,制备方法大多集中在酸水解和酶水解结合以获得得率较高的肽含量,进一步通过酶切位点的精准控制以获得有活性的肽类物质,而使用蜜蜂这类昆虫作为工具实现蛋白质的降解和生物转化是尚未见报道的。蜜蜂不仅能降解标的蛋白质,而且还能完成部分小分子肽、酶的重构,从而实现小分子肽、酶的生成、合成及生物转化。发明内容[0003]针对上述现有技术的不足,本发明的主要目的在于,提供一种牛骨小分子活性肽的生物制备方法,具体步骤如下:[0004](1)将新鲜的牛软骨洗净,加水没过牛软骨,煮沸后除去浮渣和残油,捞出牛软骨,冷却后重复上述加水、煮沸、除浮渣和残油、捞出牛软骨的步骤至少三次;牛软骨沥干后,置于-10℃~-5℃进行缓慢冷冻,冷冻完全后再进行解冻处理,如此冷冻解冻至少三次后,收集牛软骨和牛软骨解冻液;[0005](2)取步骤(1)收集的牛软骨,按牛软骨:水=200~250:800~1200的质量比加水混合,用锤片式粉碎机(型号:CSM-H系列机械粉碎机)高速剪切打浆,胶体磨(型号:JMF-280)磨浆,高压均质机(型号:GYB60-6S)剪切后,得到牛软骨混浆;[0006]然后按牛软骨混浆:完整鲜茉莉