一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113884606A(43)申请公布日2022.01.04(21)申请号202111233043.0(22)申请日2021.10.22(71)申请人生态环境部南京环境科学研究所地址210042江苏省南京市玄武区蒋王庙街8号(72)发明人李菊颖豆叶枝曹莉余佳何健孔德洋张悦清许静(74)专利代理机构北京栈桥知识产权代理事务所(普通合伙)11670代理人潘卫锋(51)Int.Cl.G01N30/06(2006.01)G01N30/88(2006.01)权利要求书2页说明书16页(54)发明名称一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法(57)摘要本发明提供了一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，包括S1、分别将蜂蜜样品和蜂花粉样品与去离子水和乙腈混合均匀，然后进行冷却、超声处理，得到提取液A和提取液B；S2、将提取液A和提取液B分别进行过滤、净化处理和氮吹，得到待测液A和待测液B；S3、配置标准储备溶液和标准工作液，并绘制标准工作曲线；将待测液A和待测液B中测定数值代入标准曲线，计算待测液A和待测液B中农药残留的含量；S4、利用标准工作曲线对待测液A和待测液B进行单离子外标法定量，最后利用待测液A和待测液B中出现的色谱峰保留时间和定性离子的精确质量数进行定性；本发明测定效率高、可靠性好，适宜大量推广。CN113884606ACN113884606A权利要求书1/2页1.一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、提取；S1‑1、分别将蜂蜜样品和蜂花粉样品与去离子水按照体积比1:3～6混合均匀，得到蜂蜜样品水溶液和蜂花粉样品水溶液；然后将所述蜂蜜样品水溶液和蜂花粉样品水溶液与乙腈按照体积比1:2～5混合均匀，得到混合液A和混合液B；S1‑2、分别将步骤S1‑1所得混合液A和混合液B分别置于‑30～‑15℃温度条件下冷却8～15min，然后在200～800W的超声功率条件下处理15～40min，最后静置10～20min，并收集乙腈层，得到提取液A和提取液B；S2、净化；S2‑1将步骤S1‑2所得提取液A和提取液B分别通过0.10～0.25μm滤膜过滤处理，然后利用GCB/PSA净化柱反复净化处理2～5次，得到预处理液A和预处理液B；S2‑2、将步骤S2‑1所得预处理液A和预处理液B分别在30～60℃温度条件下氮吹15～35min，得到待测液A和待测液B；S3、测定；S3‑1、配制浓度为1.0mg/mL的标准储备溶液，根据蜂蜜和蜂花粉中47种农药的响应，利用乙腈稀释成标准工作液；S3‑2、利用液相色谱～高分辨质谱仪检测所述标准工作液，以标准工作液的质量浓度X为横坐标，定性定量离子的峰面积Y为纵坐标，绘制标准工作曲线；然后利用自动进样器分别吸取待测液A和待测液B，并注入液相色谱～高分辨质谱仪中，待测液A和待测液B中农药组分经液相色谱柱分离，高分辨质谱全扫描检测，测得待测液A和待测液B中检出农药和内标物定量离子峰面积比值，并代入所述标准曲线，计算待测液A和待测液B中农药残留的含量；S4、结果分析；利用所述标准工作曲线对待测液A和待测液B进行单离子外标法定量，最后利用待测液A和待测液B中出现的色谱峰保留时间和定性离子的精确质量数进行定性，测得蜂蜜和蜂花粉中的农药残留种类及残留量。2.根据权利要求1所述的一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，其特征在于，步骤S1‑1中，所述混合均匀的具体操作为：将混合溶液置于振荡器上，以500～800次/min的频率震荡处8～15min。3.根据权利要求1所述的一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，其特征在于，步骤S1‑2中，收集乙腈层前，分别向所述混合液A和混合液B中加入质量浓度为15～26％的氯化钠溶液，并搅拌混合均匀，然后进行盐析处理；其中，所述氯化钠溶液的加入量分别为混合液A和混合液B体积的25～40％。4.根据权利要求3所述的一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，其特征在于，所述盐析处理的具体操作为：1)先向100mL比色管中加入质量浓度为15～26％的氯化钠溶液15～30mL，然后向比色管中加入0.1mol/L的磷酸缓冲液10～15mL；2)按比例称取所述提取液A和提取液B，并分别置于不同的漏斗中，然后将1)中混合液体分别倒入盛有提取液A和提取液B的漏斗中，并晃动2～5min；3)最后向2)中的两个漏斗中分别加入10～15mL二氯甲烷，并搅拌混合均匀，静置8～15min即可。2CN113884606A权利要求书2/2页5.根据权利要求1所述的一种蜂蜜和蜂花粉中47种农药残留测定方法，其特征在于，步骤S1‑2完成后，利用磁性纳米材料对所述提取液A和提取液B进行吸附处理，然后利用甲醇溶