预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/10
2/10
3/10
4/10
5/10
6/10
7/10
8/10
9/10
10/10

亲,该文档总共17页,到这已经超出免费预览范围,如果喜欢就直接下载吧~

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102586487A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102586487A(43)申请公布日2012.07.18(21)申请号201210069199.4(22)申请日2012.03.15(71)申请人广西壮族自治区兽医研究所地址530001广西壮族自治区南宁市友爱北路51号(72)发明人谢芝勋谢丽基邓显文谢志勤庞耀珊范晴刘加波(74)专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/68(2006.01)C12N15/11(2006.01)C12R1/93(2006.01)权利要求书权利要求书11页页说明书说明书88页页序列表序列表44页页附图附图33页页(54)发明名称鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光定量RT-PCR检测试剂盒(57)摘要本发明公开了一种鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光定量RT-PCR检测试剂盒。本发明提供了检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光PCR的引物组,由引物1、引物2、引物3和引物4组成;所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分别依次为序列表中的序列1、序列2、序列4和序列5。本发明的实验证明,本发明的引物和方法具有检测时间短、灵敏度高和特异性强的特点。CN10258647ACN102586487A权利要求书1/1页1.检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光PCR的引物组,由引物1、引物2、引物3和引物4组成;所述引物1、所述引物2、所述引物3和所述引物4的核苷酸序列分别依次为序列表中的序列1、序列2、序列4和序列5。2.检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光PCR的试剂A,由权利要求1所述的引物组、探针A和探针B组成;所述探针A的核苷酸序列为序列表中的序列3,且所述探针A的5’端标记有报告荧光染料A,3’端标记有淬灭荧光染料C;所述探针B的核苷酸序列为序列表中的序列6,且所述探针B的5’端标记有报告荧光染料B,3’端标记有淬灭荧光染料D。3.根据权利要求2所述的试剂A,其特征在于:所述报告荧光染料A为FAM,所述报告荧光染料B为ROX;所述淬灭荧光染料C为BHQ1;所述淬灭荧光染料D为BHQ2;所述试剂中所述引物1、所述引物2、所述探针A、所述引物3、所述引物4和所述探针B的摩尔比为3∶3∶3∶1∶1∶1。4.检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光PCR试剂B,由权利要2或3所示的试剂A、PCR扩增缓冲液和水组成。5.根据权利要求4所示的试剂B,其特征在于:所述引物1、所述引物2和所述探针A在所述试剂B中的浓度均为0.6μM;所述引物3、所述引物4和所述探针B在所述试剂B中的浓度均为0.2μM。6.检测鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光PCR的试剂盒,包括权利要求1所述的引物组或权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B。7.权利要求1所述的引物组或权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B或权利要求6所述试剂盒在制备检测和/或辅助检测待测样品中是否含有鸭I型肝炎病毒和/或番鸭细小病毒产品中的应用。8.根据权利要求7所述应用,其特征在于:所述检测和/或辅助检测待测样品中是否含有鸭I型肝炎病毒和/或番鸭细小病毒为用权利要求2或3所述的试剂A或权利要求4或5所述的试剂B或权利要求6所述试剂盒对所述待测样品进行二重荧光PCR反应。2CN102586487A说明书1/8页鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光定量RT-PCR检测试剂盒技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒的二重荧光定量RT-PCR检测试剂盒。背景技术[0002]鸭I型肝炎病毒(DuckHepatitisVirustypeI,DHVI)是雏鸭的一种高度致死性的病毒性传染病的病原。该病主要侵害4周龄以内的雏鸭,死亡率高达90%以上,是危害养鸭业最为严重的传染病之一。番鸭细小病毒(Muscovyducklingparvovirus,MDPV),是危害番鸭养殖的重要病原,可引起1周龄-3周龄雏番鸭发病,致死率可达到50%-80%。这两种病毒是雏鸭最易感并且致死率也非常高的病毒。鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒是危害雏鸭的最重要病原,并且感染发病后致死率非常高,因此迫切需要建立一种快速敏感的鸭I型肝炎病毒和番鸭细小病毒检测方法,在感染早期就能检测出这些病毒,从而为这些病的控制争取宝贵的时间。[0003]目前,这两种病毒的传统检测方法有血清中和试验、琼脂扩散试验和ELISA等,但这些检测存在耗时长、敏感性较低、不易标准化等缺点,在实际应用中具有一定的局限性。[0004]荧光定量PCR技术实现了对模板的定量