一种siRNA/抗癌药物联合转运复合载体及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103599549103599549A(43)申请公布日2014.02.26(21)申请号201310604244.6A61K47/18(2006.01)(22)申请日2013.11.22A61K47/26(2006.01)A61K47/20(2006.01)(71)申请人大连民族学院A61P35/00(2006.01)地址116600辽宁省大连市金州新区辽河西路18号(72)发明人张树彪张传敏赵轶男崔韶晖陈会英(74)专利代理机构大连东方专利代理有限责任公司21212代理人贾汉生李馨(51)Int.Cl.A61K48/00(2006.01)A61K9/127(2006.01)A61K47/34(2006.01)A61K47/22(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书18页说明书18页附图6页附图6页(54)发明名称一种siRNA/抗癌药物联合转运复合载体及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供一种siRNA/抗癌药物联合转运复合载体及其制备方法和应用。该复合载体组成包括由阳离子类脂和脂溶性药物构成的药物脂质体和压缩的siRNA，其中所述阳离子类脂与脂溶性药物的质量比为200∶1～1∶1，所述药物脂质体和压缩siRNA的质量比为20∶1～0.5∶1。本发明以氨基甲酸型阳离子类脂为主要材料制备脂质体，采用阳离子高聚物压缩沉默基因(siRNA)方法实现对基因的有效包封，经过靶向和长循环修饰，最终得到共载抗癌药物和沉默基因(siRNA)的纳米尺寸的新型复合载体。本发明的复合载体制备方法简单、高效，制备出的复合载体毒性低、转染率高，在物理学表征和体外生物学研究中得到了良好的评价效果。CN103599549ACN103594ACN103599549A权利要求书1/1页1.一种复合载体，其组成包括由阳离子类脂和脂溶性药物构成的药物脂质体和压缩的siRNA，其中所述阳离子类脂与脂溶性药物的质量比为200∶1～1∶1，所述药物脂质体和压缩siRNA的质量比为20∶1～0.5∶1。2.根据权利要求1所述的复合载体，其特征在于，所述阳离子类脂为氨基甲酸酯型阳离子类脂。3.根据权利要求2所述的复合载体，其特征在于，所述氨基甲酸酯型阳离子类脂具有通式I的结构：其中：----------X选自F、Cl、Br、I、H2PO4、HCO3、NO3、HSO3、CH3COO、葡萄糖酸根、葡萄糖醛酸根、半乳糖酸根、半乳糖醛酸根、丙酸根和甲磺酸根；R1选自C1-20烷基、十八烯基和胆固醇基；R2选自C1-6烷基、C1-6羟烷基、葡萄糖基、半乳糖基、甘露糖基和叶酸酯基。4.根据权利要求1所述的复合载体，其特征在于，所述脂溶性药物为抗癌药物。5.根据权利要求4所述的复合载体，其特征在于，所述抗癌药物为紫杉醇、白藜芦醇、β-榄香烯、冬凌草甲素。6.根据权利要求1所述的复合载体，其特征在于，所述压缩siRNA是siRNA中加入阳离子多聚体和带负电荷的辅助压缩物压缩而成，其中所述阳离子多聚体与siRNA的质量比为0.25∶1～5∶1。7.根据权利要求6所述的复合载体，其特征在于，所述阳离子多聚体为聚偶磷氮、阳离子多肽、多聚氨基酯或多聚氨基磷酸酯；所述带负电荷的辅助压缩物为糖胺聚糖、质粒DNA或0.4～200kbpDNA分子。8.权利要求1所述的复合载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：①按配比将阳离子类脂和脂溶性药物在脂溶性有机溶剂中混合，超声震荡溶解后，氮气吹膜，真空干燥过夜，加入45～55℃超纯水并在45～55℃下水浴2～3h，在55℃反复超声震荡至澄清，制得药物脂质体；②将步骤①得到的药物脂质体与压缩siRNA按配比混合，漩涡震荡混匀，室温孵育15～20min，得到复合载体。9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述步骤②的复合载体进行PEG化长循环修饰和/或叶酸靶向性修饰。10.权利要求1～7的任一项所述的复合载体在制备抗癌药物中的应用或在输送抗癌药物和肿瘤治疗基因中的应用。2CN103599549A说明书1/18页一种siRNA/抗癌药物联合转运复合载体及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种药物和基因的联合转运复合载体，特别涉及一种抗癌药物和压缩siRNA的联合转运新型复合载体。背景技术[0002]靶向药物和基因的联合转运治疗是一种利用载体将目的药物和基因高效传递到靶细胞或靶组织中适时释放药物和基因以达到协同治疗目标的生物医学治疗方法。在同一载体系统中联合转运药物和siRNA作用于癌细胞比单独转运siRNA或药物进行配合治疗更有效[1]。目前联合转运的想法已被提出，在同一个输送系统中联合转运药物和siRNA有望解决癌细胞容易产生