鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组及其应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111733292A(43)申请公布日2020.10.02(21)申请号202010707560.6C12R1/93(2006.01)(22)申请日2020.07.21(71)申请人广西壮族自治区兽医研究所地址530001广西壮族自治区南宁市西乡塘区友爱北路51号(72)发明人谢芝勋张艳芳邓显文刘加波谢志勤张民秀谢丽基罗思思曾婷婷(74)专利代理机构广西南宁公平知识产权代理有限公司45104代理人杨立华(51)Int.Cl.C12Q1/70(2006.01)C12Q1/686(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书7页序列表2页附图2页(54)发明名称鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组及其应用(57)摘要本发明公开了鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组，包括引物对Ⅰ和引物对Ⅱ，引物对Ⅰ由引物ANV‑F和ANV‑R组成，引物对Ⅱ由引物CIAV‑F和CIAV‑R组成；引物ANV‑F、ANV‑R、CIAV‑F和CIAV‑R分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.4的碱基序列。据此，发明人还建立了相应检测鉴定方法并研制了对应试剂盒。本发明建立的二重PCR可用于快速检测禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的混合感染，适于大批量检测，既可节约成本和节省时间，又能减少污染，具有很高的实用价值。CN111733292ACN111733292A权利要求书1/1页1.鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组，其特征在于包括引物对Ⅰ和引物对Ⅱ，引物对Ⅰ由引物ANV-F和ANV-R组成，引物对Ⅱ由引物CIAV-F和CIAV-R组成；所述引物ANV-F、ANV-R、CIAV-F和CIAV-R分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.4的碱基序列。2.根据权利要求1所述的鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组，其特征在于：所述引物ANV-F、ANV-R、CIAV-F和CIAV-R的摩尔比为1:1:1:1。3.权利要求1所述引物组在PCR扩增中的应用，其特征在于退火温度为60.0℃。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于所述PCR扩增的反应体系和反应程序分别为：反应程序：95℃预变性5min；95℃1min，60.0℃1min，72℃1min，进行35个循环；72℃延伸10min；反应体系：2×PCRMix12.5μL，其中ANV-F、ANV-R各1μL，CIAV-F、CIAV-R各1μL，模板2.0μL，ddH2O补足至25.0μL；所述引物的浓度分别为：0.5pmol/μLANV-F、0.5pmol/μLANV-R、0.5pmol/μLCIAV-F、0.5pmol/μLCIAV-R。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于所述模板来自待测样本中的病毒DNA、病毒cDNA。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述待测样本为鸡病料。7.权利要求1所述引物组在制备鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒中的应用。8.鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于含有用于检测的引物组；所述引物组包括引物对Ⅰ和引物对Ⅱ，引物对Ⅰ由引物ANV-F和ANV-R组成，引物对Ⅱ由引物CIAV-F和CIAV-R组成；所述引物ANV-F、ANV-R、CIAV-F和CIAV-R分别具有序列表SEQ.ID.NO.1至SEQ.ID.NO.4的碱基序列。9.根据权利要求8所述的鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于：所述引物ANV-F、ANV-R、CIAV-F和CIAV-R分别单独包装。10.根据权利要求4所述的鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的试剂盒，其特征在于：所述引物ANV-F、ANV-R、CIAV-F和CIAV-R的摩尔比为1:1:1:1。2CN111733292A说明书1/7页鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组及其应用技术领域[0001]本发明属于禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒检测技术领域，尤其涉及鉴定禽肾炎病毒和鸡传染性贫血病毒的引物组及其应用。背景技术[0002]禽肾炎病毒(AvianNephritisVirus，ANV)是一种肠道病毒，主要感染鸡，各龄期均可感染，但以侵害雏鸡为主，并且在火鸡、鸭子和鸽子身上均能检出。该病毒主要引起一种以典型的亚临诊症状，虽致病力不强，但感染性强，能在鸡群中迅速传播，1976年首次在日本被发现，随后其他国家陆续发生，广泛见于世界各地，严重可表现为肠炎、肾损伤及生长发育不良等，与鸡矮小综合征有关。鸡传染性贫血病由鸡传染性贫血病病毒(Chickeninfectiousanemiavirus，CIAV)引起的一种传染病，可引起3周龄以内的鸡骨髓和全身淋巴组织萎缩，