一种雷帕霉素的提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108976245A(43)申请公布日2018.12.11(21)申请号201711098381.1(22)申请日2017.11.09(71)申请人北大方正集团有限公司地址100871北京市海淀区成府路298号方正大厦8层申请人北大医药重庆大新药业股份有限公司北大医疗产业集团有限公司(72)发明人彭平张葵杨德云冉家武(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君姚自奇(51)Int.Cl.C07D498/18(2006.01)权利要求书2页说明书4页(54)发明名称一种雷帕霉素的提取方法(57)摘要本发明涉及一种雷帕霉素的提取方法，包括将雷帕霉素发酵液调pH值，过滤，得滤饼；加入第一有机溶剂萃取，过滤，得滤液，浓缩回收第一有机溶剂，得第一浓缩物；加入第二有机溶剂萃取，降温，加入碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤，静置分层；加入醋酸铵缓冲溶液，搅拌洗涤，静置分层，浓缩回收第二有机溶剂，得第二浓缩物；加入L-乳酸甲酯，搅拌溶解，过滤；降温，搅拌下滴加第三有机溶剂，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得雷帕霉素。本发明提取雷帕霉素的方法工艺简单，成本低，克服了树脂吸附、解析，处理量大，占地面积小，提取收率可达81.16％，HPLC纯度可达98.13％，主体与异构体比例可达93.9:1。CN108976245ACN108976245A权利要求书1/2页1.一种雷帕霉素的提取方法，其特征在于，包括：将雷帕霉素发酵液调pH值，过滤，得滤饼；加入第一有机溶剂萃取，过滤，得滤液，浓缩回收第一有机溶剂，得第一浓缩物；加入第二有机溶剂萃取，降温，加入碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤，静置分层；加入醋酸铵缓冲溶液，搅拌洗涤，静置分层，浓缩回收第二有机溶剂，得第二浓缩物；加入L-乳酸甲酯，搅拌溶解，过滤；降温，搅拌下滴加第三有机溶剂，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得雷帕霉素。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述第一有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、乙腈、二甲基亚砜、苯甲醇中的一种或多种；和/或，所述第二有机溶剂选自二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇、乙酸乙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酸乙酯中的一种或多种；和/或，所述第三有机溶剂选自甲丁醚、甲戊醚、乙醚、乙丙醚、乙丁醚、丙醚、丙丁醚、丁醚、戊烷、己烷、庚烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷中的一种或多种。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述第一有机溶剂的重量体积比为1：(1.5-10)，优选为1：(2.0-5.5)；和/或，以g/mL计，所述滤饼与所述第二有机溶剂的重量体积比为1：(0.6-10)，优选为1：(1.0-5.0)；和/或，所述L-乳酸甲酯与所述第三有机溶剂的体积比为1：(1-5)，优选1：(2-4)。4.根据权利要求1-3任一项所述的方法，其特征在于，是将雷帕霉素发酵液调pH值4.4-6.0，优选pH值4.8-5.5。5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所用pH值调节剂选自盐酸、硫酸、磷酸、醋酸、草酸中的一种或多种。6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述碳酸氢钠溶液的重量体积比1：(0.2-5)，优选为1：(0.5-3)；所述碳酸氢钠溶液的质量分数为3％。7.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，进一步地，以g/mL计，所述滤饼与所述醋酸铵缓冲溶液的重量体积比1：(0.2-5)，优选为1：(0.5-3)；所述醋酸铵缓冲溶液的质量分数为3％，pH值4.7-5.8，优选pH值4.8-5.5。8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，以g/mL计，所述滤饼与所述L-乳酸甲酯的重量体积比1：(0.1-3)，优选为1：(0.15-1.0)。9.根据权利要求1-8任一项所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将雷帕霉素发酵液调pH值4.4-6.0，过滤，得滤饼；加入第一有机溶剂进行萃取，过滤，得滤液；浓缩回收第一有机溶剂，得第一浓缩物；以g/mL计，所述滤饼与所述第一有机溶剂的重量体积比为1：(1.5-10)；2)向上述所得第一浓缩物中加入第二有机溶剂萃取，降温至0-10℃，加入0-10℃的3％的碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤，静置分层；加入pH值4.7-5.8的3％醋酸铵缓冲溶液，搅拌洗涤，静置分层，浓缩回收第二有机溶剂，得第二浓缩物；以g/mL计，所述滤饼与所述第二有机溶剂的重量体积比为1：(0.6-10)，以g/mL计，所述滤饼与所述碳酸氢钠溶液的重量体积比1：(0.2-5)，以g/mL计，所述滤饼与所述醋酸铵缓冲溶液的重量体积比1：(0.2-5)；2CN10897