微生物油脂及其提取方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109181842A(43)申请公布日2019.01.11(21)申请号201811048690.2(22)申请日2018.09.10(66)本国优先权数据201810949944.12018.08.20CN(71)申请人梁云地址410208湖南省长沙市岳麓区联丰路398号米兰春天C9栋107房(72)发明人瞿瀚鹏曹晟王身健(74)专利代理机构北京润平知识产权代理有限公司11283代理人乔雪微刘依云(51)Int.Cl.C11B1/02(2006.01)C11B1/00(2006.01)权利要求书2页说明书9页附图1页(54)发明名称微生物油脂及其提取方法(57)摘要本发明涉及微生物油脂的提取领域，公开了微生物油脂及其提取方法，(1)在无菌环境下，将产油微生物的发酵液与细胞壁裂解酶接触，以对发酵液中的产油微生物进行酶解，获得含有微生物油脂的混合液；(2)将步骤(1)得到的含有微生物油脂的混合液进行油相、水相和固相的三相分离，得到微生物油脂。通过上述技术方案，通过将整个工艺过程控制在无菌环境下操作，可以杜绝微生物油脂提取过程中杂菌污染，避免杂菌毒素迁移到产品中，增加微生物油脂的安全性，且所得作为毛油的微生物油脂的收率可提高到97-98％，与同行相比有了明显的提高；此外，毛油中的DHA含量或ARA含量得到了显著的提高，胞外毒素的含量得到了显著的降低。CN109181842ACN109181842A权利要求书1/2页1.一种微生物油脂的提取方法，其特征在于，该方法包括：(1)在无菌环境下，将产油微生物的发酵液与细胞壁裂解酶接触，以对发酵液中的产油微生物进行酶解，获得含有微生物油脂的混合液；(2)将步骤(1)得到的含有微生物油脂的混合液进行油相、水相和固相的三相分离，得到微生物油脂。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述细胞壁裂解酶包括碱性蛋白酶以及可选的其他酶，所述其他酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶、蜗牛酶、几丁质酶和木质素酶中的至少一种；优选的，相对于每升所述发酵液，所述细胞壁裂解酶的用量为1-5g。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，步骤(1)中，所述酶解的条件包括：pH值为8-10，温度为40-60℃，压力为0.02-0.05MPa，通气量为0.2-0.6VVM，时间为4-15小时；优选的，所述酶解在搅拌的条件下进行，搅拌的速度为8-30rpm。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述产油微生物为酵母、霉菌和藻类中的至少一种；其中，所述酵母选自浅白色隐球酵母(Cryptococcusalbidus)、弯隐球酵母(Cryptococcusalbidun)、斯达氏油脂酵母(Lipomyces)、茁芽丝孢酵母(Trichospironpullulans)、产油油脂酵母(Lipomyslipofer)、胶粘红酵母(Rhodotorulagiutinis)和圆红冬孢酵母菌(Rhodosporidiumtoruloides)中的至少一种；所述霉菌选自土霉菌(Asoergullusterreus)、紫瘫麦角菌(Clavicepspurpurea)、高梁褶抱黑粉菌(Tolyposporium)、高山被孢霉(Mortierellaalpina)和深黄被孢霉(Mortierellaisabellina)中的至少一种；所述藻类选自破囊壶菌(Thraustochytriales)、裂殖壶菌(Schizochytrium)、隐甲藻(Crypthecodinium)、硅藻(diatom)、螺旋藻(Spirulina)和吾肯氏菌属中的至少一种。5.根据权利要求1或3所述的方法，其中，所述酶解在发酵罐中进行，通过向所述发酵罐中加入食品级的碱液，所述碱液的加入量使得发酵液的pH值为8-10；所述食品级的碱液经过灭菌后通过无菌管路输送至所述发酵罐中；优选的，所述碱液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、碳酸钾溶液、碳酸氢钾溶液和氨水中的至少一种。6.根据权利要求1或3所述的方法，其中，所述酶解在酶解罐中进行，通过向所述酶解罐中加入食品级的碱液以及发酵液，所述碱液的加入量使得发酵液的pH值为8-10；所述食品级的碱液经过灭菌后通过无菌管路输送至所述酶解罐中，所述发酵液通过无菌管路输送至所述酶解罐中；优选的，所述碱液为氢氧化钠溶液、氢氧化钾溶液、碳酸钠溶液、碳酸氢钠溶液、碳酸钾溶液、碳酸氢钾溶液和氨水中的至少一种。7.根据权利要求5或6所述的方法，其中，所述灭菌的方法为高温饱和蒸汽灭菌，所述高温饱和蒸汽的压强为0.1-0.35MPa，温度为121-145℃，灭菌时间为40-80min。8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述酶解在发酵罐中进行，所