一种L-缬氨酸的生产方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109486894A(43)申请公布日2019.03.19(21)申请号201910028347.X(22)申请日2019.01.11(71)申请人内蒙古拜克生物有限公司地址010206内蒙古自治区呼和浩特市托克托县托克托工业园区(72)发明人王奇宋春慧刘培杨爱华钱莉(74)专利代理机构北京精金石知识产权代理有限公司11470代理人宋秀兰(51)Int.Cl.C12P39/00(2006.01)C12P13/08(2006.01)C12R1/13(2006.01)C12R1/74(2006.01)权利要求书1页说明书11页(54)发明名称一种L-缬氨酸的生产方法(57)摘要本发明公开了一种L-缬氨酸的生产方法，包括：S1、发酵工序：将复合菌种接入发酵培养基中，连续发酵，得到缬氨酸发酵液；S2、过滤；S3、超滤、浓缩、结晶：将步骤S2得到的滤液进行超滤，得到超滤液；将得到的超滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；向得到的浓缩液中加入溶析剂和晶粒进行结晶，抽滤干燥，得到缬氨酸粗品；S4、水溶、离子交换、脱色、精滤以及结晶：将步骤S3得到的缬氨酸粗品溶于蒸馏水中，经离子交换纯化、脱色、精滤、结晶获得高纯度缬氨酸，本发明与现有技术相比，发酵周期短，L-缬氨酸的含量高，同时提高了L-缬氨酸的收率，产品纯度高，为我国L-缬氨酸产业化发展提供了技术支持。CN109486894ACN109486894A权利要求书1/1页1.一种L-缬氨酸的生产方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、发酵工序：将复合菌种黄色短杆菌HL41(CICC10135)、热带假丝酵母(Candidatropicalis)DLPU-IL-和黄色短杆菌JHV2-58接入发酵培养基中，连续发酵，得到缬氨酸发酵液；S2、过滤：向步骤S1得到的缬氨酸发酵液中加入β-环状糊精，搅拌溶解后，利用陶瓷膜过滤，得到滤液和湿菌体；S3、超滤、浓缩、结晶：将步骤S2得到的滤液进行超滤，得到超滤液；将得到的超滤液进行蒸发浓缩，得到浓缩液；向得到的浓缩液中加入溶析剂和晶粒进行结晶，抽滤干燥，得到缬氨酸粗品；S4、水溶、离子交换、脱色、精滤以及结晶：将步骤S3得到的缬氨酸粗品，溶于蒸馏水中，经离子交换纯化、脱色、精滤、结晶获得高纯度缬氨酸。2.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，步骤S1中所述的复合菌种黄色短杆菌HL41(CICC10135)、热带假丝酵母(Candidatropicalis)DLPU-IL-和黄色短杆菌JHV2-58的质量比为3：1：1.5。3.根据权利要求2所述的生产方法，其特征在于，步骤S1中所述发酵培养基的组分包括：葡萄糖10-15g/L、海藻粉1-5g/L、玉米浆5-10g/L，硫酸铵15-35g/L，七水硫酸镁0.1-0.5g/L和磷酸二氢钾0.5-1.2g/L，灭菌前pH为6.8-7.0。4.根据权利要求3所述的生产方法，其特征在于，步骤S1中所述发酵的条件包括，发酵温度为32+2℃，压力为0.103MPa，发酵时间为40-50h。5.根据权利要求4所述的生产方法，其特征在于，步骤S1中所述发酵采用间歇式曝气，控制培养基中的溶解氧含量，具体为：(1)利用罗茨鼓风机曝气2h，使发酵培养基中的氧溶解饱和度控制在50-60％；(2)关闭罗茨鼓风机，停止曝气，监测培养液中的溶解氧；(3)当培养基中的氧溶解饱和度降至0时，重复步骤(1)-(2)。6.根据权利要求1所述的生产方法，其特征在于，步骤S2中缬氨酸发酵液与β-环状糊精的质量比为100:3-6。7.根据权利要求1-6任一项所述的生产方法，其特征在于，步骤S3中所述的结晶为：在20-50min内，以1-10mL/min的速率向20-30℃的浓缩液中加入溶洗剂，同时加入晶粒，搅拌，析出晶体。8.根据权利要求7所述的生产方法，其特征在于，所述的溶洗剂为乙醇和丙三醇。9.根据权利要求8所述的生产方法，其特征在于，所述的晶粒为10-30μm的L-缬氨酸。10.根据权利要求9所述的生产方法，其特征在于，所述浓缩液和L-缬氨酸的质量比为500-1000：1。2CN109486894A说明书1/11页一种L-缬氨酸的生产方法技术领域[0001]本发明涉及微生物发酵领域，涉及一种L-缬氨酸的生产方法，更具体地说，涉及一种L-缬氨酸的发酵及分离纯化的方法。背景技术[0002]L-缬氨酸(L-val)，学名2-氨基-3-甲基丁酸，是人体八大必需氨基酸之一，与L-亮氨酸、L-异亮氨酸统称为支链氨基酸，在医药、调味品、化妆品、营养添加剂、饲料添加剂等方面有着广泛的应用。[0003]L-缬氨酸的生产方法主要有提取法、合成法和发酵法，其中，微生物发酵法，具有原材料成本低，反应条