一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109535058A(43)申请公布日2019.03.29(21)申请号201811551592.0(22)申请日2018.12.19(71)申请人苏州昊帆生物股份有限公司地址215219江苏省苏州市高新区鸿禧路32号12栋(72)发明人吕敏杰王桂春柳敏(74)专利代理机构苏州国卓知识产权代理有限公司32331代理人明志会(51)Int.Cl.C07D207/452(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图1页(54)发明名称一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法(57)摘要本发明涉及化合物制备技术领域，尤其是一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法，包括以下步骤；将马来酰亚胺基烷基酸即化合物A在溶剂和氯化亚砜作用下，通过加热反应将化合物A结构中的羧基转变成酰氯；得到的马来酰亚胺基烷基酰氯在溶剂和各类型化合物B混合，在有机或无机碱的作用下，通过酰基化反应生成化合物C；化合物C在溶剂和酸或者碱的作用下，脱除肼端的保护基，得到含有酰肼结构马来酰亚胺基烷基酰肼，本发明以廉价易得的马来酰亚胺基烷基酸为起始原料，经过三步反应得到化合物马来酰亚胺基烷基酰肼，合成路线收率较高，产品适合用于抗体偶联药物的研发与生产，合成方法涉及的操作简便、安全可控，易于工业化生产。CN109535058ACN109535058A权利要求书1/2页1.一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤；步骤一、将马来酰亚胺基烷基酸即化合物A在溶剂和氯化亚砜作用下，通过加热反应将化合物A结构中的羧基转变成酰氯，所述化合物A与氯化亚砜的摩尔量之比为1.0:1.0-1.0:2.0，所述加热反应温度为25℃-80℃，反应时间1-8h；其具体制备过程如结构式（I）所示：结构式（I）；步骤二、将步骤一得到的马来酰亚胺基烷基酰氯在溶剂和各类型化合物B混合，在有机或无机碱的作用下，通过酰基化反应生成化合物C，所述酰氯与化合物B的摩尔量之比为1.0:1.0-1.0:1.2，反应时间1-8h；其具体制备过程结构式（II）所示：结构式（II）；步骤三、将步骤二得到的化合物C在溶剂和酸或者碱的作用下，脱除肼端的保护基，得到含有酰肼结构马来酰亚胺基烷基酰肼，所述化合物C与酸的摩尔量之比为1.0:1.0-1.0:1.5，反应时间1-8h；所述化合物C与碱的摩尔量之比为1.0:1.0-1.0:2.0；其具体制备过程结构式（III）所示：结构式（III）。2.根据权利要求1所述的一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法，其特征在于：步骤一中，所述溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯或1，2-二氯乙烷等非质子性溶剂；2CN109535058A权利要求书2/2页所述反应完成后还包括：浓缩除去溶剂以及过量的氯化亚砜，加入适量溶剂第二次浓缩除去微量残留的氯化亚砜。3.根据权利要求1所述的一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法，其特征在于：步骤二中，所述化合物B为Boc肼、丙酮腙、苯甲醛腙、Fmoc-肼等带保护基的肼；所述溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯或1，2-二氯乙烷、乙腈、二氧六环、四氢呋喃等常规溶剂；所述有机碱包括：吡啶、三乙胺、三正丙胺、二异丙基乙胺、三正丁胺以及DBU；所述无机碱包括：碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、碳酸锂和碳酸氢钠。4.根据权利要求1所述的一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法，其特征在于：步骤三中，所述溶剂为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲苯或1，2-二氯乙烷、乙腈、二氧六环、四氢呋喃等常规溶剂；所述有机酸包括：盐酸、氢溴酸、硫酸、乙酸等；所述碱包括：哌啶、DBU、吡啶、吗啉等有机强碱。3CN109535058A说明书1/10页一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法技术领域[0001]本发明涉及化合物制备技术领域，尤其涉及一种含有酰肼结构异双功能蛋白质交联剂的制备方法。背景技术[0002]马来酰亚胺基烷基酰肼是一种含有酰肼结构的蛋白质交联剂，其结构中的马来酰亚胺基端可以与蛋白结构中的巯基发生化学偶联，另一端的酰肼结构可以与化学中的基团发生化学反应，最终获得蛋白与化学药的桥接偶联，使药物具备靶向作用，是抗体偶联（ADC）药物的关键试剂，已报道的马来酰亚胺基烷基酰肼合成方法，存在起始原料价格高、纯度差、单一酰肼选择性差、收率低等问题，国内外抗体偶联药物行业对高纯度、低成本的马来酰亚胺基烷基酰肼需求越来越大，设计和开发高效、经济、绿色的符合工业化生产合成路线，具有较大经济价值和意义；关于马来酰亚胺基烷基酰肼的合成方法，目前合成路线很少，其中一条合成路线，路线如结构（IV）所示：结构（IV）；该路线使用马来酰亚胺基烷基酸琥珀酰亚胺酯作为原料，该原料价格较昂