一种多拉菌素的纯化工艺.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109651465A(43)申请公布日2019.04.19(21)申请号201910044855.7(22)申请日2019.01.17(71)申请人北大方正集团有限公司地址100871北京市海淀区成府路298号方正大厦8层申请人北大医药重庆大新药业股份有限公司北大医疗产业集团有限公司(72)发明人冯红霞张葵(74)专利代理机构北京路浩知识产权代理有限公司11002代理人王文君陈征(51)Int.Cl.C07H17/08(2006.01)C07H1/06(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称一种多拉菌素的纯化工艺(57)摘要本发明涉及一种多拉菌素的纯化工艺。所述纯化工艺包括：(1)压滤：向多拉菌素发酵液中加入絮凝剂，压滤，得到菌渣；(2)萃取、浓缩：利用有机溶剂对菌渣进行萃取，得到萃取液A；将萃取液A浓缩得到膏状物，将膏状物降温至30℃以下；(3)浸膏萃取：向膏状物中加入有机溶剂，搅拌，得到萃取液B；(4)分层：向萃取液B中加水搅拌，静置，分层，将上层液浓缩，降温抽滤，得到粗品A；(5)重结晶：利用有机溶剂对粗品A进行重结晶，降温，抽滤，得到湿晶体；干燥，得到多拉菌素成品。本发明的优点在于通过各步骤的结合和相互作用，可得到高纯度、高收率的多拉菌素。该工艺简单易行，安全性更高，适用于工业化推广。CN109651465ACN109651465A权利要求书1/1页1.一种多拉菌素的纯化工艺，其特征在于，包括：(1)压滤：向多拉菌素发酵液中加入絮凝剂，压滤，得到菌渣；(2)萃取、浓缩：利用有机溶剂对菌渣进行萃取，得到萃取液A；将萃取液A浓缩得到膏状物，将膏状物降温至30℃以下；(3)浸膏萃取：向膏状物中加入有机溶剂，搅拌，得到萃取液B；(4)分层：向萃取液B中加水搅拌，静置，分层，将上层液浓缩，降温抽滤，得到粗品A；(5)重结晶：利用有机溶剂对粗品A进行重结晶，降温，抽滤，得到湿晶体；干燥，得到多拉菌素成品。2.根据权利要求1所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述絮凝剂选自聚合氯化铝、硫酸锌、黄血盐；优选聚合氯化铝。3.根据权利要求1或2所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(1)中，所述絮凝剂的用量为每升发酵液加入5-10g絮凝剂，优选为每升发酵液加入5-7g絮凝剂。4.根据权利要求1-3任一述的纯化工艺，其特征在于，步骤(2)中，所述有机溶剂为甲醇、乙醇或醋酸丁酯，优选甲醇。5.根据权利要求1-4任一述的纯化工艺，其特征在于，步骤(2)中，所述有机溶剂的加入量为每千克菌渣使用2-5L有机溶剂，优选3-4L有机溶剂。6.根据权利要求1-5任一所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(3)中，所述有机溶剂为二氯甲烷、甲醇或乙醇，优选先加入二氯甲烷搅拌，再加入甲醇搅拌。7.根据权利要求1-6任一所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(3)中，所述二氯甲烷的加入量为膏状物重量的4-6倍；和/或，所述甲醇的加入量为膏状物重量的1-3倍。8.根据权利要求1-7任一所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(4)中，所述水的加入量为甲醇用量的10％-20％；和/或，所述下层液重复分层1-2次；和/或，所述浓缩温度为45℃-65℃。9.根据权利要求1-8任一所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(5)中，所述有机溶剂为乙酸乙酯、乙醇、丙酮，优选乙酸乙酯；和/或，所述有机溶剂的用量为3-5ml/g，优选为3ml/g。10.根据权利要求1-9任一所述的纯化工艺，其特征在于，步骤(5)中，所述重结晶的条件为：在55℃-60℃下溶解搅拌，然后自然降温结晶，降温至5-10℃；和/或，所述干燥温度为40℃-50℃。2CN109651465A说明书1/4页一种多拉菌素的纯化工艺技术领域[0001]本发明涉及工业微生物技术领域，具体涉及一种多拉菌素的纯化工艺。背景技术[0002]多拉菌素为新型、广谱抗寄生虫药，对胃肠道线虫、肺线虫、螨、蜱和伤口蛆等均有高效，用于治疗家畜线虫病和螨病等体外寄生虫病，主要适用于牛和猪。[0003]现有技术公开了多拉菌素的几种纯化方法，如CN104693254A公开了一种多拉菌素的分离方法，其将发酵液经过浸提、浓缩、打浆、结晶等步骤，得到高纯度的多拉菌素。该方法收率较好，步骤简单，但打浆过程中会产生很多母液，此母液杂质甚多，非常难于回收。[0004]CN108976270A公开了一种高纯度多拉菌素的制备方法，该方法将发酵液浸泡、分离，通过超滤膜进行纯化，再通过两次逆流萃取，得到萃取液通过浓缩结晶。该方法使用溶剂均可通过较简单方式回收利用，但存在所使用的甲苯、正庚烷等溶媒危险度高，实际操作不方便，且使用超纳滤膜成本高等缺陷。[0005]有鉴于此，特提出本发明。发明内容[