一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN109678778A(43)申请公布日2019.04.26(21)申请号201811618531.1(22)申请日2018.12.28(71)申请人苏州昊帆生物股份有限公司地址215219江苏省苏州市高新区鸿禧路32号12栋(72)发明人吕敏杰王桂春柳敏(74)专利代理机构苏州国卓知识产权代理有限公司32331代理人明志会(51)Int.Cl.C07D207/448(2006.01)权利要求书1页说明书3页附图1页(54)发明名称一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺(57)摘要本发明涉及提纯分离技术领域，尤其是一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，包括以下步骤；步骤一、配料：按照重量百分比包括主料：马来酰亚胺基烷基酸40-50%、二氯甲烷27-43%，氯化亚砜5-10%，对硝基苯酚5-10%，碳酸钠4-12%，步骤二、制备：按照上述比例将马来酰亚胺基烷基酸与二氯甲烷和氯化亚砜加入反应釜内搅拌混合2-3h，步骤三、合成反应；步骤四、提纯，本发明制备的异双功能蛋白质交联剂合成路线收率较高，不涉及昂贵试剂的使用，成本低，易于工业化生产，采用了纳米膜分离技术，滤除了小分子和无机盐等杂质，提高了异双功能蛋白质交联剂的品质，产品纯度从95%提高到99%以上。CN109678778ACN109678778A权利要求书1/1页1.一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，其特征在于，包括以下步骤；步骤一、配料：按照重量百分比包括主料：马来酰亚胺基烷基酸40-50%、二氯甲烷27-43%，氯化亚砜5-10%，对硝基苯酚5-10%，碳酸钠4-12%；步骤二、制备：按照上述比例将马来酰亚胺基烷基酸与二氯甲烷和氯化亚砜加入反应釜内搅拌混合2-3h，然后将反应釜升温至25℃-30℃进行反应3-8h；步骤三、合成反应：按照上述比例将对硝基苯酚加入反应釜内与步骤一得到的溶剂均匀的混合，之后向反应釜内加入碳酸钠进行缩合反应3-8h得到异双功能蛋白质交联剂；步骤四、提纯：S1、将步骤三得到的溶剂加入平衡缸（1）内储存；S2、将平衡缸（1）内的溶剂通过供料泵（2）的加压以一定的流速通过管道输送到膜组件（3）内进行膜分离；S3、小于膜截留分子量的物质透过膜组件（3）形成渗透液被排出，大于膜截留分子量的物质则被膜组件（3）截留后的浓缩液经压力表（4）和调节阀（5）流回平衡缸（1）。2.根据权利要求1所述的一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，其特征在于：步骤三中，所述合成反应完成后还包括：浓缩除去过量的氯化亚砜。3.根据权利要求1所述的一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，其特征在于：步骤四中，所述供料泵（2）与膜组件（3）之间的管道螺接流量计（6）。4.根据权利要求1所述的一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，其特征在于：所述平衡缸（1）的左侧顶端焊接有螺旋输料斗（7）。2CN109678778A说明书1/3页一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺技术领域[0001]本发明涉及提纯分离技术领域，尤其涉及一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺。背景技术[0002]蛋白质交联剂是一类小分子化合物，具有2个或者更多的针对特殊基团（-NH2、-COOH、-HS等）的反应性末端，可以和2个或者更多的分子分别偶联，从而使这些分子结合在一起，70年代时人们普遍使用戊二醛作为蛋白质交联剂连接抗体和指示剂（如酶类），但其缺点是由于交联基团是随机的，容易形成杂乱的多聚体，80年代，更具选择特异性的交联剂，例如NHS（针对-COOH）和马来酰亚胺（针对-HS)在生命科学研究中得到了更为广泛的应用，巧妙地运用交联剂可以在蛋白质相互作用研究，免疫学，癌症治疗等领域取得意想之外的收获，目前在生命科学研究中，特别是抗体偶联药物的合成中应用广泛；传统的异双功能蛋白质交联剂有机反应后处理主要是依赖蒸馏、重结晶等方法，在少量反应时效果较好，但产业化时就存在操作复杂、提纯度不高、损失较大等缺点，所以用于合成抗体偶联药物后的药效大打折扣。发明内容[0003]本发明的目的在于提供一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，以解决上述背景技术中提出的问题，本发明采用了纳米膜分离技术，滤除了小分子和无机盐等杂质，提高了异双功能蛋白质交联剂的品质。[0004]为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：设计一种异双功能蛋白质交联剂的提纯膜分离工艺，包括以下步骤；步骤一、配料：按照重量百分比包括主料：马来酰亚胺基烷基酸40-50%、二氯甲烷27-43%，氯化亚砜5-10%，对硝基苯酚5-10%，碳酸钠4-12%。[0005]步骤二、制备：按照上述比例将马来酰亚胺基烷基酸与二氯甲烷和氯化亚砜加入反应釜内搅拌混合2-3