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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110642936A(43)申请公布日2020.01.03(21)申请号201810671869.7(22)申请日2018.06.26(71)申请人深圳翰宇药业股份有限公司地址518057广东省深圳市南山区高新技术工业园中区翰宇生物医药园办公大楼四层(72)发明人汪伟宓鹏程陶安进袁建成(74)专利代理机构深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙)44285代理人王仲凯(51)Int.Cl.C07K14/635(2006.01)C07K1/14(2006.01)C07K1/06(2006.01)C07K1/04(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图2页(54)发明名称一种制备特立帕肽的方法(57)摘要本发明属于药物化学技术领域,公开了一种制备特立帕肽的方法。本发明所述制备特立帕肽的方法采用片段缩合制备特立帕肽。首先分别合成特立帕肽第1-16位肽序列(片段A)和第17-34位肽序列(片段B),然后,将两个片段偶联得到特立帕肽粗肽,纯化获得特立帕肽。本发明中的片段侧链没有保护基,在水中有较好的溶解度,不存在偶联困难的问题,操作简单,生产效率高。得到的特立帕肽产品纯度高,易于纯化。实验表明,本发明得到的特立帕肽的粗肽纯度可得到80%,总收率能达到45%。经过简单的纯化精肽纯度可达到99.92%,单个最大杂质0.05%。与现有技术相比,本发明具有产品质量高、成本低、适合工业化生产等特点。CN110642936ACN110642936A权利要求书1/2页1.一种制备特立帕肽的方法,其特征在于,包括:步骤1:将3-Fmoc-4-二氨基苯甲酸与固相载体偶联,再按照肽序从C端至N端依次偶联Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Val-OH和PG-Ser(tBu)-OH,然后通过对硝基氯甲酸苯酯关环形成苯并咪唑酮,最后通过水杨醛和TFA裂解得到片段APG-Ser-Val-Ser-Glu-Ile-Gln-Leu-Met-His-Asn-Leu-Gly-Lys-His-Leu-Asn-SAL;步骤2:将Fmoc-Phe-OH与固相载体偶联,再按照肽序从C端至N端依次偶联Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-His(Trt)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Trp(Boc)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Met-OH和Fmoc-Ser(tBu)-OH,TFA裂解得到片段BSer-Met-Glu-Arg-Val-Glu-Trp-Leu-Arg-Lys-Lys-Leu-Gln-Asp-Val-His-Asn-Phe-OH;步骤3:将片段A和片段B偶联,然后脱除片段A中1位Ser的保护基得到特立帕肽粗肽;步骤4:特立帕肽粗肽纯化得到特立帕肽;其中步骤1和步骤2顺序不分先后。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述固相载体为RinkAmideResin或2-Cl-CTCResin。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述偶联剂为HOBt/DIPCDI、HOBt/PyBop/DIPEA、HATU/HOAt/DIPEA、HOAt/PyAop/DIPEA或HBTU/HOBt/DIPEA。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述PG-Ser(tBu)-OH的PG为Msz保护基、Teoc保护基、Fmoc保护基。5.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤1所述裂解的裂解剂为TFA与水的混合溶液。6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2所述固相载体为WangResin。7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2所述偶联的偶联剂为HOBt/DIPCDI、HOBt/DMAP/DIPCDI、HOBt/PyBop/DIPEA、HATU/HOAt/DIPEA、HOAt/PyAop/DIPEA或HBTU/HOBt/DIPE