射干异黄酮苷元的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN110846354A(43)申请公布日2020.02.28(21)申请号201911199028.1(22)申请日2019.11.29(71)申请人邯郸学院地址056005河北省邯郸市邯山区学院北路530号(72)发明人昝立峰梁瑞娟杨香瑜(74)专利代理机构石家庄国为知识产权事务所13120代理人郝晓红(51)Int.Cl.C12P17/06(2006.01)C12R1/645(2006.01)权利要求书1页说明书4页(54)发明名称射干异黄酮苷元的制备方法(57)摘要本发明涉及中药制备技术领域，具体公开一种射干异黄酮苷元的制备方法。所述射干异黄酮苷元的制备方法，是将射干须根的醇提液去醇处理后加入粗毛纤孔菌的发酵液中进行酶解，去除酶解液中的酶和菌体杂质，进行树脂吸附纯化，得到射干异黄酮苷元。本发明制备条件温和，方法简单，成本低，大大提高了从射干须根中提取和制备的射干异黄酮苷元的纯度和收率。CN110846354ACN110846354A权利要求书1/1页1.一种射干异黄酮苷元的制备方法，其特征在于：将射干须根的醇提液去醇处理后加入粗毛纤孔菌的发酵液中进行酶解，去除酶解液中的酶和菌体杂质，进行树脂吸附纯化，得到射干异黄酮苷元。2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述射干须根的醇提液是将射干须根粉碎后加入60-80vt％的乙醇溶液中，50-70℃浸提得到。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述射干须根粉碎至粒度为20-40目；和/或所述浸提过程分两次进行，第一次浸提过程中，射干须根与乙醇溶液的质量比为1:12-14，800-1000r/min浸提15-30min；第二次浸提过程中，射干须根与乙醇溶液的质量比为1:8-10，800-1000r/min浸提15-30min。4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述去醇处理过程是对醇提液进行过滤、蒸发浓缩至醇提液中醇的含量≤5vt％。5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述粗毛纤孔菌的发酵液是将粗毛纤孔菌接种到培养液中，28-30℃培养7-10天，对培养液中的菌体进行破壁处理得到的匀浆酶液；和/或所述粗毛纤孔菌的发酵液的添加体积为去醇处理后的浓缩液体积的5-10％；和/或所述酶解过程为：40-55℃、pH4-6的条件下酶解1-3天。6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：所述培养液按质量配比包括0.6-0.8％的麦芽提取物、0.07-0.08％的酵母提取物、0.8-1.2％的蛋白胨和余量的蒸馏水。7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述去除酶解液中的酶和菌体杂质的过程为：向酶解液中加入絮凝剂，沉淀2-3h，进行离心过滤，得到清液。8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：所述絮凝剂为壳聚糖、明胶和A+B澄清剂中的一种或多种的组合；所述絮凝剂的加入量为酶解液质量的3-5％。9.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述树脂为大孔吸附树脂。10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于：所述树脂吸附纯化过程为：将酶解液稀释1-1.5倍，加入大孔吸附树脂中，控制吸附流速为1-1.5BV/h，吸附完成后，先用20-40vt％的乙醇溶液进行洗脱除杂，再用60-80vt％的乙醇溶液洗脱、浓缩和干燥。2CN110846354A说明书1/4页射干异黄酮苷元的制备方法技术领域[0001]本发明涉及中药制备技术领域，尤其涉及一种射干异黄酮苷元的制备方法。背景技术[0002]射干为鸢尾科植物的干燥根茎，味苦、性寒，入肝、肺经，具有清热解毒、利咽消痰的功效，主要用于咽喉肺痈、痰咳气喘等症，为治疗喉痹咽痛之要药。[0003]采挖射干药材时会产生大量须根，须根中含有芒果苷、鸢尾苷、野鸢尾苷等异黄酮苷类的物质，以及鸢尾黄素、野鸢尾黄素、次野鸢尾黄素、白射干素等苷元物质，有研究表明次野鸢尾黄素等苷元物质对脂多糖诱导引起的巨噬细胞RAW264.7具有明显的抗炎特性，能够显著降低诱导型一氧化氮合酶的转录和翻译水平，以及降低NO的产生，同时次野鸢尾黄素等苷元物质能显著抑制肿瘤免疫细胞TNF-α、IL-1β、IL-6的转录和翻译水平，次野鸢尾黄素等苷元物质还能阻止α-突触核蛋白的积累，减缓羟多巴胺引起多巴胺能神经元的退行性病变，增强食物的敏感性、延长寿命，该化合物还具有对潜在帕金森疾病的治疗作用，而鸢尾苷和野鸢尾苷等异黄酮苷类物质的活性却不及异黄酮苷元。但射干须根中游离的异黄酮苷元含量较低，分离提取异黄酮苷元的难度大、提取收率低，得到的提取物中异黄酮苷元的纯度低，提取成本较高，因此，种植户都把采挖时产生的须根扔掉，浪费了大量的药材资源。发明内容[0004]针对现有从射干药材须根中分离提取异黄酮苷元的提取