从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN111848708A(43)申请公布日2020.10.30(21)申请号202010728500.2(22)申请日2020.07.27(71)申请人湖南华诚生物资源股份有限公司地址410205湖南省长沙市高新区杏康南路8号(72)发明人李伟黄华学(74)专利代理机构长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205代理人王艳宁星耀(51)Int.Cl.C07H17/07(2006.01)C07H1/08(2006.01)C07C11/21(2006.01)C07C7/00(2006.01)C07J9/00(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法(57)摘要从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法。本发明方法首先采用碱性低碳醇/水溶液对罗汉果提取渣进行粗提，然后将粗提物经硅胶拌样后进行超临界萃取，分离出角鲨烯和经超临界萃取的粗提物拌样硅胶；进一步，柱层析经超临界萃取的粗提物拌样硅胶，依次分离出其中的谷甾醇和罗汉果黄素，并分别进行纯化后，获得谷甾醇成品和罗汉果黄素成品。本发明方法同时提取角鲨烯、谷甾醇和罗汉果黄素三种活性成分，可将罗汉果提取渣资源综合利用，工艺连贯，可操作性强，生产成本低，适合工业化生产，且各种活性成分的含量高、收率高。CN111848708ACN111848708A权利要求书1/2页1.从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）碱性低碳醇提取：将罗汉果提取渣破碎，加入碱性加入碱性低碳醇/水溶液，室温避光搅拌提取，过滤，得提取滤液；（2）粗提物的干燥：将步骤（1）所得提取滤液用酸中和，减压浓缩至无醇，往浓缩液中加入层析硅胶，搅拌均匀，真空干燥至恒重，得粗提物拌样硅胶；（3）角鲨烯的分离和纯化：将步骤（2）所得粗提物拌样硅胶投入二氧化碳超临界萃取器中，通入含有夹带剂的二氧化碳气体进行萃取，萃取结束后，降温减压至常温常压，得初萃物；初萃物先用有机溶剂稀释溶解，再用碱水反萃取，将有机溶剂层用水洗至中性，分液，有机层加入硅藻土，搅拌，过滤，减压浓缩至无溶剂，得角鲨烯成品和经超临界萃取后的拌样硅胶；（4）硅胶柱分离：取步骤（3）经超临界萃取后的拌样硅胶，投入硅胶层析柱中，依次用洗脱剂I和洗脱剂II对硅胶柱进行洗脱，分别收集洗脱液I和洗脱液II；（5）谷甾醇的分离和纯化：将洗脱液I减压浓缩至无溶剂，干燥，得谷甾醇粗品；将谷甾醇粗品用脂溶性有机溶剂溶解，加入硅藻土，搅拌回流，趁热过滤，浓缩，将浓缩液冷却，搅拌析晶，抽滤，滤饼干燥，得谷甾醇成品；（6）罗汉果黄素的分离和纯化：将洗脱液II加入中性氧化铝，搅拌回流，趁热过滤，浓缩，干燥，得罗汉果黄素成品。2.根据权利要求1所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述罗汉果提取渣，是指罗汉果鲜果或干果用水提取罗汉果甜苷之后的废渣，包括罗汉果果籽和罗汉果果壳。3.根据权利要求1或2所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述碱性低碳醇/水溶液中的低碳醇为甲醇、乙醇和异丙醇中的一种或几种，低碳醇的体积分数为40%～99%；每1kg罗汉果提取渣加入5～10L碱性低碳醇/水溶液。4.根据权利要求1～3任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述碱性低碳醇中的碱为氢氧化钠或氢氧化钾，所述碱性低碳醇中碱的质量百分比浓度为0.5%～2%，所述室温搅拌提取的时间为6～8小时；优选地，步骤（2）中，所述的酸为无机酸，具体为盐酸、硫酸。5.根据权利要求1～4任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（2）中，每1kg罗汉果提取渣加入0.1～0.2L层析硅胶。6.根据权利要求1～5任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述超临界萃取的温度为35～45℃，压力为20～28MPa，时间为1～2小时；优选的，所述夹带剂为甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯、石油醚、环己烷、正己烷和水中的一种或几种，所述夹带剂的加入量为罗汉果提取渣的0.01%～0.1%。7.根据权利要求1～6任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性成分的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述有机溶剂为石油醚、乙醚、正己烷、环己烷、6#溶剂油、120#溶剂油、乙酸乙酯中的一种或几种，每千克罗汉果提取渣（湿重）中加入的0.05～2L有机溶剂；优选地，步骤（3）中，所述硅藻土的用量为罗汉果提取渣（湿重）的1‰～5‰。8.根据权利要求1～7任一项所述从罗汉果提取渣中分离角鲨烯等多种活性