从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113398157A(43)申请公布日2021.09.17(21)申请号202110792921.6(22)申请日2021.07.14(71)申请人湖南华诚生物资源股份有限公司地址410205湖南省长沙市高新区杏康南路8号(72)发明人李伟黄华学(74)专利代理机构长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205代理人宁星耀舒欣(51)Int.Cl.A61K36/42(2006.01)A61K133/00(2006.01)权利要求书2页说明书6页(54)发明名称从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法(57)摘要从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，包括以下步骤：（1）挥发油的提取：将干燥的罗汉果花破碎，加有机溶剂回流提取，得含挥发油的有机溶剂提取液和含总黄酮和总皂苷的提取渣；（2）挥发油的纯化；（3）总黄酮和总皂苷的提取：将所述提取渣回流提取；（4）总黄酮和总皂苷的富集：将醇提取液浓缩，得含总黄酮和总皂苷的浓缩液；（5）总皂苷的分离：将所述浓缩液用大孔型阴离子交换树脂柱脱色，得总皂苷产品；（6）总黄酮的分离：将分离总皂苷后的阴离子交换树脂柱用碱液洗脱，得总黄酮产品。本发明能连续提取分离多种天然活性成分、所得产品含量高、收率高、对设备要求低、生产成本低。CN113398157ACN113398157A权利要求书1/2页1.从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）挥发油的提取：将干燥的罗汉果花破碎，置于提取罐内，然后加入有机溶剂，回流提取，过滤，得含挥发油的有机溶剂提取液和含总黄酮和总皂苷的提取渣；（2）挥发油的纯化：将步骤（1）所得的有机溶剂提取液加脱色剂搅拌脱色，过滤，收集滤液，将滤液浓缩，得罗汉果花挥发油产品；（3）总黄酮和总皂苷的提取：将步骤（1）所得的提取渣中的有机溶剂蒸馏干净，然后加入甲醇或乙醇，回流提取，过滤，得醇提取液；（4）总黄酮和总皂苷的富集：将步骤（3）所得的醇提取液减压浓缩，用大孔吸附树脂柱吸附，然后用乙醇将大孔吸附树脂柱洗脱，收集、浓缩洗脱液，得含总黄酮和总皂苷的浓缩液；（5）总皂苷的分离：将步骤（4）所得含总黄酮和总皂苷的浓缩液用大孔型阴离子交换树脂柱脱色，收集阴离子交换树脂柱流出液，减压浓缩，干燥，得总皂苷产品；（6）总黄酮的分离：将步骤（5）中分离总皂苷后的阴离子交换树脂柱用碱液洗脱，得碱洗脱液；然后将碱洗脱液用酸中和，再用纳滤膜脱盐，收集纳滤膜截留液，将纳滤膜截留液减压浓缩，干燥，得总黄酮产品。2.根据权利要求1所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述有机溶剂为低极性有机溶剂与乙酸乙酯的混合溶剂；所述低极性有机溶剂优选乙醚、石油醚、己烷、环己烷、庚烷、6#溶剂油和120#溶剂油中的一种或几种；所述低极性有机溶剂与乙酸乙酯的体积比优选为5～10：1。3.根据权利要求1或2所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述有机溶剂的用量为原料罗汉果花重量的10～20倍（L/kg）；所述回流提取的时间为2～4小时。4.根据权利要求1~3之一所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述脱色剂为活性炭、活性白土、硅藻土、氧化铝吸附树脂和硅胶吸附树脂中的一种或几种；所述脱色剂的用量为原料罗汉果花重量的0.1%～2%；所述搅拌脱色的时间为1～4小时。5.根据权利要求1~4之一所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述甲醇或乙醇的体积分数为50%～90%；所述甲醇或乙醇的用量为原料罗汉果花重量的10～20倍（L/kg）；所述回流提取的时间为2～4小时。6.根据权利要求1~5之一所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB‑8、LX‑38或DM130；大孔吸附树脂的用量（体积）为原料罗汉果花重量的0.5～1倍（L/kg）；大孔吸附树脂柱的高径比为4～6:1；上柱的流速为0.5～1.0BV/小时。7.根据权利要求1~6之一所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述大孔型阴离子交换树脂的型号为D941、D945、LSA‑700或LSD762；阴离子树脂的用量为原料罗汉果花重量的0.5～1倍（L/kg）；阴离子交换树脂柱的高径比优选为4～6:1；上柱的流速优选为0.5～1.0BV/小时。8.根据权利要求1~7之一所述的从罗汉果花中连续提取分离多种天然活性成分的方法，其特征在于，步骤（6）中，所述碱液为氢氧化钠或氢氧化钾的水溶液；碱液的质量