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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112159445A(43)申请公布日2021.01.01(21)申请号202011050284.7(22)申请日2020.09.29(71)申请人浩宇康宁健康科技(湖北)有限公司地址433000湖北省仙桃市三伏潭镇发展大道东段5号(72)发明人王代军蒋宇峰陈松陶雷(74)专利代理机构北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)11463代理人王焕(51)Int.Cl.C07H19/048(2006.01)C07H1/06(2006.01)权利要求书1页说明书7页(54)发明名称β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法和制备方法(57)摘要本发明涉及核苷酸类物质提纯技术领域,尤其是涉及一种β‑烟酰胺单核苷酸的纯化方法和制备方法。β‑烟酰胺单核苷酸的纯化方法,包括如下步骤:采用硅胶柱对β‑烟酰胺单核苷酸粗产物进行层析分离,湿法上样后进行梯度洗脱;所述梯度洗脱包括:采用醇类溶剂作为流动相淋洗1~5个柱体积脱除前杂,再用体积分数为75%~90%的醇类溶剂的水溶液淋洗0.5~1个柱体积,再用体积分数为35%~70%的醇类溶剂的水溶液淋洗至洗脱液中无β‑烟酰胺单核苷酸;收集体积分数为35%~70%的醇类溶剂的水溶液淋洗的洗脱液,脱色处理后,脱溶处理。本发明的纯化方法得到的β‑烟酰胺单核苷酸纯度高、收率高。CN112159445ACN112159445A权利要求书1/1页1.β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:采用硅胶柱对β-烟酰胺单核苷酸粗产物进行层析分离,湿法上样后进行梯度洗脱;所述梯度洗脱包括:采用醇类溶剂作为流动相淋洗1~5个柱体积脱除前杂,再用体积分数为75%~90%的醇类溶剂的水溶液淋洗0.5~1个柱体积,再用体积分数为35%~70%的醇类溶剂的水溶液淋洗至洗脱液中无β-烟酰胺单核苷酸;收集体积分数为35%~70%的醇类溶剂的水溶液淋洗的洗脱液,脱色处理后,除溶处理。2.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述醇类溶剂包括甲醇、乙醇和异丙醇中的任一种或多种。3.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述湿法上样后,吸附10~60min,再进行所述梯度洗脱;优选的,所述湿法上样后,吸附30~40min,再进行所述梯度洗脱。4.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述硅胶柱的径高比为1﹕(5~10);优选的,所述硅胶柱的径高比为1﹕(7~8)。5.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述梯度洗脱的流速为1~4bv/h;优选的,所述梯度洗脱的流速为2~3bv/h。6.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述脱色处理的方法包括:采用活性炭进行所述脱色。7.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述除溶处理包括:将所述脱色处理后的物料旋蒸处理除去醇类溶剂,然后进行冷冻干燥处理。8.根据权利要求1所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述β-烟酰胺单核苷酸粗产物的制备方法包括:(a)烟酰胺核糖的氯化物与三氯氧磷在溶剂中,于-10~20℃反应5~10h,停止反应;(b)向步骤(a)反应后的物料中加水,缓慢加入碱液中和,过滤并采用醇的水溶液洗滤饼,收集滤液,将所述滤液进行除盐处理,固液分离收集液体。9.根据权利要求8所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法,其特征在于,所述烟酰胺核糖的氯化物与所述三氯氧磷的质量比为(1.2~1.8)﹕1;优选的,所述溶剂包括磷酸三甲酯。10.β-烟酰胺单核苷酸的制备方法,其特征在于,包括权利要求1-9任一项所述的β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法。2CN112159445A说明书1/7页β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法和制备方法技术领域[0001]本发明涉及核苷酸类物质提纯技术领域,尤其是涉及一种β-烟酰胺单核苷酸的纯化方法和制备方法。背景技术[0002]β-烟酰胺单核苷酸,又称作β-NMN,是自然存在的生物活性核苷。由于烟酰胺属于维生素B3,因而NMN属于维生素B族衍生物范畴,广泛参与人体多项生化反应,与免疫、代谢息息相关。NMN是NAD+的前体,其功能也主要通过NAD+体现。随着年龄的增长,NMN和NAD+水平均呈下降趋势,而NAD+代谢产物NAM呈上升趋势。衰老过程中NAD+的下降被认为是导致疾病和残疾的主要原因,如听力和视力丧失,认知和运动功能障碍,免疫缺陷,自身免疫炎症反应失调导致的关节炎、代谢障碍和心血管疾病。[0003]因此,补充NMN能够提高体内NAD+含量,从而延缓、改善、防止衰老等,或改善年龄诱导的代谢紊乱、老年疾病等,具有重要意义。[0004]NMN可以经内源物