一种固相萃取包及其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113009016A(43)申请公布日2021.06.22(21)申请号202110208618.7G01N30/72(2006.01)(22)申请日2021.02.24G01N30/86(2006.01)(71)申请人南通市疾病预防控制中心地址226001江苏省南通市崇川区工农南路189号(72)发明人郭新颖史玉坤杨清华(74)专利代理机构北京精金石知识产权代理有限公司11470代理人尉月丽(51)Int.Cl.G01N30/02(2006.01)G01N30/06(2006.01)G01N30/30(2006.01)G01N30/32(2006.01)G01N30/34(2006.01)权利要求书2页说明书11页附图18页(54)发明名称一种固相萃取包及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种固相萃取包及其制备方法和应用，涉及化学检测技术领域。本发明固相萃取包由固相萃取剂与盐析萃取包组成，其中固相萃取剂为采用了一步水热法、丙烯酸改性和低温氧化协同聚合反应合成的聚苯胺@碳微球。该固相萃取包能够用于根及根茎、果实种子、花、皮、菌藻五种药用部位的46种中药材中的真菌毒素样品前处理，具有简单快速、高效省力、成本低廉、环境友好等优点。同时，结合同位素内标‑超高效液相色谱串联质谱法(UPLC‑MS/MS)高通量在线检测，可以检测出中药材中常见的16种真菌毒素，精确度好、灵敏度高、检出限低、回收率高，可以很好地用于中药材中真菌毒素检测，具有良好的市场应用前景。CN113009016ACN113009016A权利要求书1/2页1.一种固相萃取剂，其特征在于，由聚苯胺和碳微球复合而成。2.权利要求1所述固相萃取剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采用一步水热法合成碳微球；(2)将步骤(1)制得的碳微球浸于丙烯酸溶液增加活性位点；(3)通过低温氧化协同聚合反应在步骤(2)处理过的碳微球表面合成聚苯胺，即得聚苯胺@碳微球。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)具体为：取碳水化合物溶于水，置于反应釜中控温160‑180℃反应4‑10h，降温至60‑80℃反应3‑5h，将所得液体离心、洗涤，循环3次，洗涤剂为水和乙醇，反复洗涤得到粒径大小可控的碳微球；优选地，所述碳水化合物为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉、纤维素、糖原中的一种或几种；所述碳水化合物与水的质量体积比为1‑2g：8‑10mL。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)具体为：将步骤(1)所得碳微球置于丙烯酸溶液中，超声分散5‑10min，60‑80℃水浴加热1‑2小时，常温干燥得到改性碳微球；优选地，所述丙烯酸溶液的质量浓度为2％‑5％；所述碳微球与丙烯酸溶液的质量体积比为1‑2g：10‑20mL。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)具体为：将步骤(2)所得改性碳微球置于高氯酸水溶液中，超声分散均匀，加入苯胺，在冰浴条件下搅拌10‑20min，逐滴加入过硫酸铵引发剂，继续冰浴搅拌8‑12h，反应完成后，产物依次用无水乙醇和二次去离子水反复离心洗涤，烘干即得聚苯胺@碳微球；优选地，所述高氯酸水溶液的摩尔浓度为0.8‑1.5mol/L；所述改性碳微球与高氯酸水溶液的质量体积比为1‑2g：10‑14mL。6.一种固相萃取包，其特征在于，由权利要求1所述的固相萃取剂或权利要求2‑5任一项所述方法制备得到的固相萃取剂与一定质量配比的萃取盐析包组成。7.根据权利要求6所述的固相萃取包，其特征在于：所述萃取盐析包由氯化钠、无水硫酸钠和硫酸铵按质量比1:2‑4:2‑4混合而成。8.权利要求6‑7任一项所述固相萃取包在中药材真菌毒素分析检测中的应用。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品前处理：将中药材样品真空干燥后粉碎，粉末过筛，四分法缩分得到均质样品；所得均质样品加入萃取剂，涡旋混匀，室温浸泡，振荡提取后恒温超声提取，调节pH；利用萃取盐析包提取上层有机相；将前述有机相加入同位素内标溶液，加入固相萃取剂处理，过有机相滤膜，得待测液；优选地，所述真空干燥温度设置为60‑80℃、时间设置为4‑6h，筛孔直径为0.2‑0.5mm，pH值设定为5.5‑6.0；所述样品、萃取盐析包的质量比为1:0.6‑1；(2)利用同位素内标‑液相色谱串联质谱法检测步骤(1)所得待测液中的真菌毒素；优选地，所述中药材选自生建曲、西洋参、天麻、党参、黄芪、当归、百合、麦冬、川贝、白芍、重楼、甘草、柴胡、制何首乌、制川乌、葛根、地黄、生半夏、赤芍、白术、山药、山奈、苦杏仁、枸杞子、五倍子、薏苡仁、预知子、山楂、芡实、菟丝子、五味子、牛蒡子、盐补骨脂、苘麻子、