一种从罗汉果中分离罗汉果醇的方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113773360A(43)申请公布日2021.12.10(21)申请号202111067279.1(22)申请日2021.09.13(71)申请人湖南华诚生物资源股份有限公司地址410205湖南省长沙市高新区杏康南路8号(72)发明人李伟黄华学贺进军黄俊宋谷良江小龙吴国亮(74)专利代理机构长沙星耀专利事务所(普通合伙)43205代理人宁星耀舒欣(51)Int.Cl.C07J9/00(2006.01)权利要求书2页说明书7页(54)发明名称一种从罗汉果中分离罗汉果醇的方法(57)摘要一种从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，包括以下步骤：（1）提取、水解：将罗汉果碾破，破壳但不破籽，加入酸水，加热提取并水解，得罗汉果总皂苷水解液；（2）罗汉果总皂苷水解物的制备：将所述罗汉果总皂苷水解液冷却至室温，用碱液中和，静置沉淀，离心过滤，取滤饼干燥，得罗汉果总皂苷水解物；（3）硅胶拌样；（4）湿法装柱及干法上样；（5）梯度洗脱；（6）浓缩、结晶、干燥，即得罗汉果醇产品。本发明不需要以高含量的罗汉果甜苷成品或罗汉果提取物为原料，将罗汉果甜苷提取和水解过程合二为一，罗汉果总苷损耗低，罗汉果醇收率高，产品中的罗汉果醇含量高。CN113773360ACN113773360A权利要求书1/2页1.一种从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）提取、水解：将罗汉果碾破，破壳但不破籽，加入酸水，加热提取并水解，然后粗过滤除去果壳及果籽，得罗汉果总皂苷水解液；（2）罗汉果总皂苷水解物的制备：将步骤（1）所得的罗汉果总皂苷水解液冷却至室温，用碱液中和，静置沉淀，离心过滤，取滤饼干燥，得罗汉果总皂苷水解物；（3）硅胶拌样：将步骤（2）所得的罗汉果总皂苷水解物用无水甲醇或乙醇分散，加入柱层析硅胶，搅拌，混合均匀，干燥，得拌样硅胶；（4）湿法装柱及干法上样：往层析柱中先加入乙酸乙酯，再倒入柱层析硅胶，最后将步骤（3）所得的拌样硅胶覆盖，得硅胶层析柱；（5）梯度洗脱：依次用洗脱剂I和洗脱剂II对步骤（4）所得的硅胶层析柱进行梯度洗脱，收集洗脱剂II洗脱所得的洗脱液II；（6）浓缩、结晶、干燥：将步骤（5）所得的洗脱液II减压浓缩，得浓缩液，将浓缩液冷冻降温，搅拌析晶，抽滤，真空干燥，即得罗汉果醇产品。2.根据权利要求1所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述酸水为盐酸或硫酸的水溶液；所述酸水的质量百分比浓度为0.5%～5.0%；所述酸水的体积用量为罗汉果原料重量的5～10倍（L/kg）。3.根据权利要求1或2所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述加热的温度为95～120℃；所述加热提取并水解的时间为4～6小时。4.根据权利要求1~3之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的碱液为氢氧化钠或氢氧化钾水溶液；所述中和的pH值为6～8。5.根据权利要求1~4之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述无水甲醇或无水乙醇的体积用量为罗汉果总皂苷水解物重量的1～3倍（L/kg）；所述柱层析硅胶的用量为罗汉果总皂苷水解物重量的2～4倍。6.根据权利要求1~5之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（4）中，所述柱层析硅胶的用量为罗汉果总皂苷水解物重量的8～10倍；步骤（3）和步骤（4）中，所述柱层析硅胶的粒度规格为100～400目；步骤（4）中，所述硅胶层析柱的高径比为6～10：1。7.根据权利要求1~6之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述洗脱剂I为乙酸乙酯‑甲醇/乙醇混合溶液，其中甲醇/乙醇的体积占比为洗脱剂I总体积的1%～5%；所述洗脱剂I的用量为2～4BV，所述洗脱剂I洗脱的流速为0.5～2.0BV/小时。8.根据权利要求1~7之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（5）中，所述洗脱剂II为乙酸乙酯‑甲醇/乙醇混合溶液，其中甲醇/乙醇的体积占比为洗脱剂II总体积的10%～20%；所述洗脱剂II的用量为2～4BV，所述洗脱剂II洗脱的流速为0.5～2.0BV/小时。9.根据权利要求1~8之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（6）中，所述浓缩液的固形物含量为10%～15%。10.根据权利要求1~9之一所述的从罗汉果中分离罗汉果醇的方法，其特征在于，步骤（6）中，所述冷冻的温度为‑5～5℃；所述搅拌的速度为30～90r/min；所述析晶的时间为122CN113773360A权利要求书2/2页～24小时。3CN113773360A说明书1/7页一种从罗汉果中分离罗汉果醇的方法[0001]技术