一种谷甘二肽的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114262358A(43)申请公布日2022.04.01(21)申请号202111495787.XC07K1/02(2006.01)(22)申请日2021.12.08(71)申请人苏州天马医药集团天吉生物制药有限公司地址215101江苏省苏州市吴中区木渎镇花苑东路199号(72)发明人黄莉董玉军徐德银李介林徐琦(74)专利代理机构苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙)32257代理人王玉仙(51)Int.Cl.C07K5/072(2006.01)C07K1/30(2006.01)C07K1/08(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种谷甘二肽的制备方法(57)摘要本发明公开了一种谷甘二肽的制备方法，与常规二肽合成方法HOSu/DCC相比，本发明使用HONB，DIC为试剂制备活化酯，杂质少，纯度高的优势，且制备得到的活化酯Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB用甲醇低温打浆，能提高中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB的纯度，特别是除HONB的效果很好。最终获得的产品纯度达到99.5％以上，手性杂质均在0.1％以下，并且收率较高，达到80％以上。本发明方法操作都是简单的常规操作，比如打浆，重结晶等，没有过柱，液相纯化等繁琐操作；本发明方法适合工业化放大。CN114262358ACN114262358A权利要求书1/1页1.一种谷甘二肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、以Fmoc‑Glu(OtBu)‑OH为原料，和N‑羟基‑5‑降冰片稀‑2,3‑二酰亚胺HONB、N,N‑二异丙基碳二亚胺DIC在有机溶剂中反应生成中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯；S2、将中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯和甘氨酸，在碱性条件下，在溶剂中缩合反应得到Fmoc‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH粗品；S3、将S2步骤得到的Fmoc‑Glu(OtBu)‑Gly‑OH粗品用酯类溶剂和烷基类溶剂的混合溶剂进行重结晶，得到所述的谷甘二肽。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在S1步骤中，还包括采用甲醇对反应生成的中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯进行打浆纯化的步骤，具体包括：将反应液除去80～95％的第一有机溶剂，加入甲醇在15‑20℃下搅拌至大量固体析出，继续搅拌1～2h后抽滤，抽滤后依次用甲醇、甲基叔丁基醚淋洗，淋洗后干燥得到中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的N‑羟基‑5‑降冰片稀‑2,3‑二酰亚胺HONB与Fmoc‑Glu(OtBu)‑OH的摩尔比为1.0～1.5:1。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂与Fmoc‑Glu(OtBu)‑OH的体积质量比为5～15:1。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的有机溶剂为二氯甲烷。6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯与甘氨酸的摩尔比为1:1.0～1.5。7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，在S2步骤中，溶剂为乙腈、四氢呋喃、二氧六环、丙酮中的一种或几种与水形成的混合溶剂。8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的混合溶剂与中间体Fmoc‑Glu(OtBu)‑ONB活性酯的体积质量比为5～10:1。9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的酯类溶剂和烷基类溶剂的体积比为1:0.5～1。10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述的酯类溶剂为乙酸乙酯或乙酸异丙酯，所述的烷基类溶剂为石油醚或正庚烷。2CN114262358A说明书1/5页一种谷甘二肽的制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种谷甘二肽的制备方法，属于药物制备技术领域。背景技术[0002]司美格鲁肽(Semaglutide)用于治疗成人II型糖尿病。此药是高血糖素样肽(GLP‑1)受体激动剂，刺激胰岛素分泌，降低高血糖素分泌，与血白蛋白结合半衰期为1周，故用预充笔每周1次给药，辅助饮食和运动，改善成人II型糖尿病患者的血糖控制。[0003]司美格鲁肽的多肽序列为：[0004]His‑Aib‑Glu‑Gly‑Thr‑Phe‑Thr‑Ser‑Asp‑Val‑Ser‑Ser‑Tyr‑Leu‑Glu‑Gly‑Gln‑Ala‑Ala‑Lys(AEEA‑AEE‑γ‑Glu‑Octadecanedioicmono‑t‑Butylester)‑Glu‑Phe‑Ile‑Ala‑Trp‑Leu‑Val‑Arg‑Gly‑Arg‑Gly‑OH[0005]其中，由Glu‑Gly在该序列中出现两次。