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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN114685600A(43)申请公布日2022.07.01(21)申请号202011595873.3(22)申请日2020.12.28(71)申请人武汉远大弘元股份有限公司地址430074湖北省武汉市东湖新技术开发区关山二路特一号国际企业中心3幢6层1号(72)发明人何嘉俊朱程军张凯莉李建华李敬唐鹏查丽燕苏海霞郭丽萍黄蕾凡佩张吉书杨磊刘莎(74)专利代理机构上海弼兴律师事务所31283专利代理师王卫彬黄益澍(51)Int.Cl.C07K5/062(2006.01)C07K1/30(2006.01)权利要求书1页说明书9页附图7页(54)发明名称一种丙谷二肽的分离纯化方法(57)摘要本发明提供了一种丙谷二肽的分离纯化方法,其包括以下步骤:向溶解于甲酸的丙谷二肽粗品中添加溶剂,所述溶剂包括氢氧化钠的醇溶液,待所述丙谷二肽粗品析晶完全后,降温后离心即可。使用本发明的分离纯化方法分离纯化丙谷二肽时,能够有效去除三肽、四肽、以及多肽杂质,所得丙谷二肽的收率高且纯度高,并且对设备和工艺环境要求较低,更适于工业化生产。CN114685600ACN114685600A权利要求书1/1页1.一种丙谷二肽的分离纯化方法,其特征在于,其包括以下步骤:向溶解于甲酸的丙谷二肽粗品中添加溶剂,所述溶剂包括氢氧化钠的醇溶液,待所述丙谷二肽粗品析晶完全后,降温后离心即可。2.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述溶解为通过搅拌进行溶解,优选在室温通过搅拌进行溶解;和/或,所述的溶解于甲酸的丙谷二肽粗品中不含水;和/或,所述的添加优选通过滴加的方式进行。3.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述氢氧化钠的醇溶液中氢氧化钠占所述醇溶液的质量体积比为5‑20%,例如15%。4.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述的醇溶液为低级醇溶液,其中所述低级醇优选为含有6个碳原子以下的一元醇和二元醇,所述的醇溶液例如为乙醇溶液、甲醇溶液、异丙醇或乙二醇溶液。5.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述溶剂还包括小极性溶剂,所述小极性溶剂为溶于醇类但不溶于水的直链烷烃或其衍生物,所述小极性溶剂优选自正庚烷、正己烷和甲基叔丁基醚中的一种或多种。6.如权利要求5所述的分离纯化方法,其特征在于,所述小极性溶剂的体积为所述甲酸体积的0.5‑2.5倍,例如0.75倍或1倍。7.如权利要求5或6所述的分离纯化方法,其特征在于,所述氢氧化钠的醇溶液与所述小极性溶剂的体积比为(0.2‑1.5):1,例如0.5:1、0.75:1或1:1。8.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述溶解于甲酸的丙谷二肽粗品中,所述丙谷二肽粗品与所述甲酸的质量体积比为(0.5‑1):1,例如为1:1。9.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述降温为降温至5‑10℃。10.如权利要求1所述的分离纯化方法,其特征在于,所述丙谷二肽粗品为经酶催化法制得的粗品。2CN114685600A说明书1/9页一种丙谷二肽的分离纯化方法技术领域[0001]本发明涉及一种丙谷二肽的分离纯化方法。背景技术[0002]丙谷二肽(AlanylGlutamine),化学名为N(2)‑L‑丙氨酰‑L‑谷氨酰胺(见式1),分子式:C8H15N3O4,分子量:217.15。本品为白色结晶性粉末;无臭无味;易溶于水、甲酸,不溶于乙醇、甲醇、丙酮和乙醚。[0003][0004]谷氨酰胺是一种条件必需氨基酸,是生物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶等的重要前体物质,也是蛋白质合成与分解的调节物。但谷氨酰胺本身由于不稳定、水溶性低而不能直接作为药物,只有将其转化为稳定的衍生物才能充分发挥谷氨酰胺对人体的作用。PeterFurst等发现丙氨酰谷氨酰胺(简称丙谷二肽)是谷氨酰胺理想替代品并于1995年将其开发为肠外营养用药。该药物具有促进肌肉蛋白合成、改善危重病人的临床与生化指标、维持肠道功能、保持机体氮平衡、增强免疫系统等作用,尤其在对大面积突发性创伤的病人具有重要的营养支持作用,目前在欧美等被广泛使用。[0005]丙谷二肽的合成方法早期为化学合成法,但化学法合成,存在步骤较长,用到的化学试剂较多等问题,限制了其工业化应用。[0006]近年来由于日本科学家Yokozeki和Hara等在酶技术上的突破(YokozekiK.,HaraS.,JournalofBiotechnology,2005,115(02):211‑220.),采用酶法合成丙谷二肽能够直接以L‑丙氨酸和L‑谷氨酰胺为底物在酶催化的作用下一步合成丙谷二肽,与之前的化学合成法相比技术上,成本上、安全上都取得飞跃性突破,但是该技术路线会产生难以去除的三肽杂质丙氨酰丙氨酰谷氨酰胺、四肽