预览加载中,请您耐心等待几秒...
1/10
2/10
3/10
4/10
5/10
6/10
7/10
8/10
9/10
10/10

在线预览结束,喜欢就下载吧,查找使用更方便

如果您无法下载资料,请参考说明:

1、部分资料下载需要金币,请确保您的账户上有足够的金币

2、已购买过的文档,再次下载不重复扣费

3、资料包下载后请先用软件解压,在使用对应软件打开

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115992117A(43)申请公布日2023.04.21(21)申请号202211660926.4(51)Int.Cl.(22)申请日2022.12.23C12N9/36(2006.01)C12N15/56(2006.01)(83)生物保藏信息C12N15/81(2006.01)CGMCCNo.261222022.11.11C12N1/19(2006.01)CGMCCNo.261232022.11.11C12R1/84(2006.01)CGMCCNo.261242022.11.11(71)申请人江苏创健医疗科技股份有限公司地址213100江苏省常州市金坛区双龙路28号(72)发明人刘小海王丽萍钱晨明程鹏飞王昊豆荣昆凡孝菊(74)专利代理机构南京智造力知识产权代理有限公司32382专利代理师陈佳佳权利要求书1页说明书6页序列表(电子公布)附图2页(54)发明名称一种重组人溶菌酶及其制备方法和应用(57)摘要本发明提供了一种重组人溶菌酶及其制备方法和应用,属于生物工程技术领域,本发明提供的重组人溶菌酶,通过对现有氨基酸序列进行优化,在不改变溶菌酶性质的条件下,减少毕赤酵母在表达过程中对其的降解,以提高溶菌酶在发酵纯化工艺的收率;所述重组人溶菌酶优选SEQIDNO.1、SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示的氨基酸序列;本发明的重组溶菌酶,在纯化后的酶活与天然人重组溶菌酶酶活相当;与天然序列相似度高,其免疫原性低,与传统蛋清纯化获得的溶菌酶相比更适合于医药行业。CN115992117ACN115992117A权利要求书1/1页1.一种重组人溶菌酶,其特征在于,所述重组人溶菌酶包括SEQIDNO.1、SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示的氨基酸序列,或与SEQIDNO.1、SEQIDNO.2或SEQIDNO.3具有80%以上、85%以上、90%以上、95%以上、96%以上、97%以上、98%以上、99%以上同一性并维持溶菌酶活性的氨基酸序列。2.根据权利要求1所述的重组人溶菌酶,其特征在于,所述重组人溶菌酶为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2或SEQIDNO.3所示的氨基酸序列。3.多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸编码权利要求1‑2任一项所述的重组人溶菌酶。4.根据权利要求3所述的多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸包括SEQIDNO.5、SEQIDNO.6或SEQIDNO.7所示的核苷酸序列、或其简并序列。5.重组载体,其特征在于,所述重组载体包括权利要求3或4所述的多核苷酸。6.工程菌或细胞,其特征在于,所述工程菌或细胞包括权利要求3或4所述的多核苷酸,或权利要求5所述的重组载体,或表达权利要求1‑2任一项所述的重组人溶菌酶;优选地,所述工程菌或细胞为为毕赤酵母。7.根据权利要求6所述的工程菌或细胞,其特征在于,所述工程菌或细胞保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为:CGMCCNo.26122、CGMCCNo.26123、CGMCCNo.26124。8.组合物,其特征在于,所述组合物包括权利要求1‑2任一项所述的重组人溶菌酶、或权利要求3或4所述的多核苷酸、或权利要求5所述的重组载体、或权利要求6或7所述的工程菌或细胞。9.制品,其特征在于,所述制品包括权利要求1‑2任一项所述的重组人溶菌酶、或权利要求3或4所述的多核苷酸、或权利要求5所述的重组载体、或权利要求6或7所述的工程菌或细、或权利要求8所述的组合物;优选地,所述制品选自药物、医疗器械、生物材料、组织工程产品、化妆品或保健品。10.权利要求1‑2任一项所述的重组人溶菌酶、或权利要求3或4所述的多核苷酸、或权利要求5所述的重组载体、或权利要求6或7所述的工程菌或细、或权利要求8所述的组合物在制备药物、医疗器材、生物材料、组织工程产品、化妆品或保健品中的用途。11.一种重组人溶菌酶的制备方法,其特征在于,所述方法包括:将权利要求6或7所述的工程菌或细胞高密度发酵,对发酵上清液进行纯化,获得重组人溶菌酶。12.一种减少人溶菌酶重组表达降解的方法,其特征在于,所述方法包括:将SEQIDNO.1所示天然人溶菌酶氨基酸序列第13位氨基酸赖氨酸替换为谷氨酸;或将SEQIDNO.1所示天然人溶菌酶氨基酸序列第13位氨基酸赖氨酸替换为精氨酸,第14位精氨R替换为赖氨酸。13.根据权利要求12所述的方法,其特征在于,所述重组表达为采用毕赤酵母表达。2CN115992117A说明书1/6页一种重组人溶菌酶及其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及一种重组人溶菌酶及其制备方法和应用,属于生物工程技术领域。背景技术[0002]溶菌酶普遍存在于人体多种组织中,鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液