一种重组新型冠状病毒N蛋白、应用及抗原检测试剂盒.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115838402A(43)申请公布日2023.03.24(21)申请号202211220867.9(22)申请日2022.10.08(71)申请人江苏美克医学技术有限公司地址210000江苏省南京市江北新区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学产业园二期C栋3楼(72)发明人孙康俊刘美江(74)专利代理机构无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260专利代理师曹慧萍(51)Int.Cl.C07K14/165(2006.01)C07K16/10(2006.01)G01N33/569(2006.01)G01N33/558(2006.01)权利要求书1页说明书11页序列表（电子公布）附图2页(54)发明名称一种重组新型冠状病毒N蛋白、应用及抗原检测试剂盒(57)摘要本发明提供一种重组新型冠状病毒N蛋白、应用及抗原检测试剂盒，首先构建了重组新型冠状病毒N蛋白，并将其作为免疫源制备小鼠抗新型冠状病毒N蛋白IgM抗体和兔抗新型冠状病毒N蛋白IgG抗体，并将两者配对制备新型冠状病毒检测试剂或试剂盒，特异性高，灵敏度高。CN115838402ACN115838402A权利要求书1/1页1.重组新型冠状病毒N蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示。2.以SEQIDNO:1所示重组新型冠状病毒N蛋白作为免疫源获得的抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段。3.根据权利要求2所述的抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段包括小鼠抗新型冠状病毒N蛋白IgG或IgM抗体、和兔抗新型冠状病毒N蛋白IgG抗体。4.根据权利要求3所述的抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段，其特征在于：所述抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段包括小鼠抗新型冠状病毒N蛋白IgM抗体和兔抗新型冠状病毒N蛋白IgG抗体。5.根据权利要求2‑4任一项所述的抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段在制备用于辅助诊断或检测新型冠状病毒感染的试剂中的用途。6.根据权利要求2‑4任一项所述的抗新型冠状病毒N蛋白抗体或其抗原结合片段在制备试剂中的用途，所述试剂用于评价新型冠状病毒感染患者的治疗情况。7.一种试剂盒，其特征在于：包括权利要求3所述的小鼠抗新型冠状病毒N蛋白IgM抗体和兔抗新型冠状病毒N蛋白IgG抗体。8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒为免疫层析试剂盒、酶联免疫试剂盒或化学发光试剂盒。9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒为免疫层析试剂盒，包括检测卡，检测卡包括：底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸；底板为PVC板；所述的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水纸依次互相交错搭接后粘贴在所述的底板上；结合垫上喷涂有兔抗新型冠状病毒N蛋白IgG抗体标记的示踪标志物，示踪标志物为包括胶体金、乳胶微球、荧光微球在内的纳米颗粒，划线位置从吸水纸往加样孔方向依次为：C线、T线，其中C线固定羊抗鼠IgG抗体，T线固定的小鼠抗新型冠状病毒N蛋白IgM抗体。10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括外壳，检测卡组装在上壳和下壳扣合而成的外壳中，上壳上设置有加样孔和观察窗，加样孔对应于样品垫，观察窗对应于T线和C线。2CN115838402A说明书1/11页一种重组新型冠状病毒N蛋白、应用及抗原检测试剂盒技术领域[0001]本发明涉及一种重组新型冠状病毒N蛋白、应用及抗原检测试剂盒，属于新型冠状病毒抗原检测技术领域。背景技术[0002]新型冠状病毒SARS‑CoV‑2是引起新型冠状病毒肺炎(CoronaVirusDisease2019，COVID‑19)(简称“新冠肺炎”)的重要病原体。目前，新冠病毒仍处于变异阶段，其突变位点数量多，传播性强。新冠病毒的结构蛋白主要有表面刺突蛋白(spikeprotein，S)，包膜蛋白(envelopeprotein，E)，膜蛋白(membraneprotein，M)和核衣壳蛋白(nucleocapisidprotein，N)。其中，N蛋白是感染中主要表达的结构蛋白之一，是早期诊断检测SARS‑CoV‑2感染的理想靶点，可在临床症状出现前一天检测到该蛋白表达，故N蛋白是最好的感染早期诊断的标志物之一。[0003]截至目前，新冠的核酸检测作为确诊的“金标准”，虽具有灵敏度和特异性较高的优点，但费用昂贵，取样困难，对检测设备或平台要求较高。新冠病毒的抗原检测可直接证明，诊断快速、准确、对设备和人员要求低，无需特殊检测仪器，通过颜色10分钟～20分钟就可以判断结果，从而可实现居家自检。因此，开发针对新冠病毒抗原蛋白的检测试剂盒具有重要意义。发明内容[0004]本发明为了解决现有技术