一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116047065A(43)申请公布日2023.05.02(21)申请号202210408994.5(22)申请日2022.04.19(71)申请人杭州迈尔德生物科技有限公司地址310000浙江省杭州市长河街道滨安路688号2幢C楼2层218室(72)发明人范春雷(74)专利代理机构杭州浙科专利事务所(普通合伙)33213专利代理师龚如朝(51)Int.Cl.G01N33/569(2006.01)G01N33/558(2006.01)G01N33/577(2006.01)G01N33/532(2006.01)C07K16/10(2006.01)权利要求书3页说明书9页附图1页(54)发明名称一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒(57)摘要本发明公开了一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒，包括两条独立的检测条，分别标识为试纸条N和试纸条S，它们各设置2条检测线；试纸条N的ONT1检测线包被抗新型冠状病毒Omicron株N蛋白特异性抗体（检测型）、NT2检测线包被可识别野生型和各种突变株的抗新型冠状病毒N蛋白通用型抗体（检测型）；试纸条S的OST1检测线包被抗新型冠状病毒Omicron株S1蛋白特异性抗体（检测型）、ST2检测线包被可识别野生型和各种突变株的抗新型冠状病毒S1蛋白通用型抗体（检测型）。本发明试剂盒可通过快速(3‑15分钟)、简便、低成本的方法不但能检测新型冠状病毒各种株型，而且能把Omicron株鉴别出来，对于Omicron株的流行病学调查具有重要价值。CN116047065ACN116047065A权利要求书1/3页1.一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括两条独立的检测条，分别用于检测新型冠状病毒N蛋白抗原和S蛋白抗原，分别标识为试纸条N和试纸条S，它们各设置2条检测线；其中试纸条N的ONT1检测线包被抗新型冠状病毒Omicron株N蛋白特异性抗体（检测型）、NT2检测线包被可识别野生型和各种突变株的抗新型冠状病毒N蛋白通用型抗体（检测型）；试纸条S的OST1检测线包被抗新型冠状病毒Omicron株S1蛋白特异性抗体（检测型）、ST2检测线包被可识别野生型和各种突变株的抗新型冠状病毒S1蛋白通用型抗体（检测型）。2.如权利要求1所述的一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒，其特征在于抗新型冠状病毒Omicron株N蛋白特异性抗体以及抗新型冠状病毒N蛋白通用型抗体的制备方法包括以下步骤：1）合成新型冠状病毒Omicron株N蛋白近N端的特异性多肽序列作为抗原表位，将合成的作为抗原表位的特异性多肽序列偶连于免疫蛋白，制备成免疫抗原；2）将步骤1）制备好的免疫抗原免疫动物，在测得高效价免疫血清后分离免疫动物的B淋巴细胞，制备单克隆抗体细胞株；以野生型及各种突变株的新型冠状病毒N蛋白为反应抗原，筛选出抗新型冠状病毒Omicron株N蛋白特异性单克隆抗体；3）步骤2）中筛到的抗新型冠状病毒Omicron株N蛋白特异性单克隆抗体细胞株大量扩增制备抗体备用；4）合成新型冠状病毒N蛋白6个保守区域的多肽序列作为抗原表位，将合成的作为抗原表位的多肽序列分别偶连于免疫蛋白，制备成6个免疫抗原；5）将步骤4）制备好的6个免疫抗原分别免疫动物，在测得高效价免疫血清后分离免疫动物的B淋巴细胞，制备单克隆抗体细胞株；以野生型及各种突变株的新型冠状病毒N蛋白为反应抗原筛选2个或2个以上不同抗原表位的新型冠状病毒N蛋白通用型单克隆抗体；抗新型冠状病毒Omicron株S1蛋白特异性抗体以及抗新型冠状病毒S蛋白通用型抗体的制备方法包括以下步骤：S1：用新型冠状病毒Omicron株S1蛋白免疫动物，在测得高效价免疫血清后分离免疫动物的B淋巴细胞，制备单克隆抗体细胞株；以野生型及各种突变株的新型冠状病毒S1蛋白为反应抗原筛选新型冠状病毒Omicron株S1蛋白特异性单克隆抗体以及新型冠状病毒S1蛋白通用型单克隆抗体；S2：将步骤S1中筛到的新型冠状病毒Omicron株S1蛋白特异性单克隆抗体细胞株和通用型单克隆抗体细胞株大量扩增制备抗体备用。3.如权利要求2所述的一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒，其特征在于步骤1）中，新型冠状病毒Omicron株N蛋白近N端的抗原表位特异性多肽顺序为NALRITFGGPSDSTGSNQNGGAR，合成时在其C末端添加一个半胱氨酸，利用半胱氨酸的巯基，通过巯基‑二巯基交换反应将合成的多肽偶联于免疫蛋白，免疫蛋白为KLH、BSA、OVA或BGG。4.如权利要求2所述的一种能鉴别Omicron株的新型冠状病毒抗原快速检测试剂盒