检测唾液新型冠状病毒N-S抗原的试剂盒及其应用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN112485425A(43)申请公布日2021.03.12(21)申请号202011285784.9(22)申请日2020.11.17(71)申请人宁波美丽人生医药生物科技发展有限公司地址315899浙江省宁波市保税西区创业大道7号4幢305室(72)发明人田晓丽(74)专利代理机构无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260代理人张静汝(51)Int.Cl.G01N33/569(2006.01)G01N33/558(2006.01)G01N33/577(2006.01)权利要求书2页说明书4页序列表3页附图3页(54)发明名称检测唾液新型冠状病毒N-S抗原的试剂盒及其应用方法(57)摘要本发明属于生物检测技术领域，尤其涉及检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，检测卡包括样品垫、胶体碳结合垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物；样品垫、胶体碳结合垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸依次粘贴在反应支持物上，样品垫的一端压覆胶体碳结合垫的一端，胶体碳结合垫的另一端压覆硝酸纤维素膜的一端，吸水滤纸压覆硝酸纤维素膜的另一端；胶体碳结合垫为含有胶体碳标记的mAbN1和mAbS1的胶体碳垫。本发明提供的试剂盒及其应用方法，以N蛋白和S蛋白作为新型冠状病毒检测的靶点，选取唾液作为检测样本，能够简化新型冠状病毒的检测流程，不对任何实验仪器、环境或者操作人员具有依赖性，操作简单、方便、检测周期短、易于判读；另外，不需要特殊的仪器设备，不需要专业培训，适应性强，便于随时随地的监测和检验。CN112485425ACN112485425A权利要求书1/2页1.检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，其特征在于，包括检测卡，所述检测卡包括样品垫、胶体碳结合垫、硝酸纤维素膜、吸水滤纸、反应支持物；所述样品垫、所述胶体碳结合垫、所述硝酸纤维素膜和所述吸水滤纸依次粘贴在所述反应支持物上，所述样品垫的一端压覆所述胶体碳结合垫的一端，所述胶体碳结合垫的另一端压覆所述硝酸纤维素膜的一端，所述吸水滤纸压覆所述硝酸纤维素膜的另一端；所述胶体碳结合垫为含有胶体碳标记的mAbN1和mAbS1的胶体碳垫；所述mAbN1表示抗新型冠状病毒N抗原的单克隆抗体1，所述新型冠状病毒N抗原的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，所述mAbN1获取方法如下：通过所述新型冠状病毒N抗原作为免疫原免疫动物制备得到的一株单克隆抗体；所述mAbS1表示抗新型冠状病毒S抗原的单克隆抗体1，所述新型冠状病毒S抗原的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示，所述mAbS1获取方法如下：通过所述新型冠状病毒S抗原作为免疫原免疫动物制备得到的一株单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，其特征在于，所述硝酸纤维素膜设置有第一检测条带、第二检测条带、第一质控条带和第二质控条带，所述第一检测条带、所述第二检测条带并排设置，且均设于所述硝酸纤维素膜靠近所述胶体碳结合垫的一侧，所述第一检测条带含有mAbN2，所述第二检测条带含有mAbS2，所述第一质控条带和所述第二质控条带并排设置，且均设于所述硝酸纤维素膜远离所述胶体碳垫的一侧，均含有羊抗鼠IgG多克隆抗体；所述mAbN2表示抗新型冠状病毒N抗原的单克隆抗体2，所述mAbN2和mAbN1分别为所述新型冠状病毒N抗原不同表位的抗体，所述mAbN2获取方法如下：通过所述新型冠状病毒N抗原作为免疫原免疫动物制备得到的另一株单克隆抗体；所述mAbS2表示抗新型冠状病毒S抗原的单克隆抗体2，所述mAbS2和mAbS1分别为所述新型冠状病毒S抗原不同表位的抗体，所述mAbS2获取方法如下：通过所述新型冠状病毒S抗原作为免疫原免疫动物制备得到的另一株单克隆抗体。3.根据权利要求2所述的检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，其特征在于，所述检测条带和所述质控条带的长度均为0.35‑0.4cm，宽度均为0.5‑1mm，所述检测条带和所述质控条带的间距均为3.5‑4mm。4.根据权利要求1所述的检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，其特征在于，还包括唾液采集器，所述唾液采集器的出液口可拆卸地连接所述胶体碳垫。5.检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒的应用方法，基于权利要求1‑4任一项所述的检测唾液新型冠状病毒N‑S抗原的试剂盒，其特征在于，包括如下步骤：S1，收集唾液样品；S2，将样品垫与所述唾液样品接触至少2分钟，所述唾液样品将依次沿着反应支持物上的各个附着物向吸水滤纸的方向移动；S3，当在观察窗口有液体出现时，将所述检测卡与所述唾液样品分离，并置于干净平整工作台，15分钟后获得对唾液中新型冠状病毒N抗原和S抗原的检测结果。6.根据权利要求5所述检测唾液新型冠状病毒N‑S