靶向间皮素的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850490A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202111118230.4C12N15/62(2006.01)(22)申请日2021.09.23C12N15/867(2006.01)C12N5/10(2006.01)(71)申请人深圳宾德生物技术有限公司A61K39/00(2006.01)地址518000广东省深圳市南山区前海深A61P35/00(2006.01)港合作区前湾一路1号A栋201室(入驻深圳市前海商务秘书有限公司)(72)发明人刘茂玄王琪许晨光戴昆(74)专利代理机构深圳市慧实专利代理有限公司44480专利代理师孙东杰(51)Int.Cl.C07K16/30(2006.01)C07K16/28(2006.01)C07K19/00(2006.01)C12N15/13(2006.01)权利要求书1页说明书6页序列表8页附图2页(54)发明名称靶向间皮素的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用(57)摘要本申请提供了一种靶向间皮素的纳米抗体，其包括如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列。该纳米抗体的结构稳定性高，与间皮素的结合活性较高，对人的免疫原性较弱，可应用到过表达间皮素的阳性肿瘤的诊断、治疗中。本申请还提供了靶向间皮素的嵌合抗原受体、嵌合抗原受体T细胞及其制备、重组载体，以及它们在制备诊断和/或治疗恶性肿瘤的药物中的应用。CN115850490ACN115850490A权利要求书1/1页1.一种靶向间皮素的纳米抗体，其特征在于，所述靶向间皮素的纳米抗体包括如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列。2.如权利要求1所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向间皮素的纳米抗体的编码基因包括如SEQIDNO：2所示的核苷酸序列。3.一种靶向间皮素的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向间皮素的嵌合抗原受体包括顺次连接的靶向间皮素的纳米抗体、胞外铰链区、跨膜区和胞内信号区，其中，所述靶向间皮素的纳米抗体如权利要求1或2所示。4.如权利要求3所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体，其特征在于，所述胞外铰链区包括CD8α铰链区，所述跨膜区包括CD8跨膜区，所述胞内信号区包括从氨基端到羧基端顺次连接的4‑1BB信号区和CD3ζ信号区。5.如权利要求4所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向间皮素的嵌合抗原受体的氨基酸序列包括如SEQIDNO：3所示的氨基酸序列。6.如权利要求5所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体，其特征在于，所述靶向间皮素的嵌合抗原受体的编码基因包括如SEQIDNO：4所示的核苷酸序列。7.一种靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞，其特征在于，其表面表达如权利要求3‑6任一项所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体。8.一种重组载体，其特征在于，包括如权利要求3‑6任一项所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体的编码基因。9.一种靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞的制备方法，其特征在于，包括：(1)提供靶向间皮素的嵌合抗原受体的编码基因，包括从5’端到3’端顺次连接的信号肽的编码基因、靶向间皮素的纳米抗体的编码基因、胞外铰链区的编码基因、跨膜区的编码基因、胞内信号区的编码基因，其中，所述靶向间皮素的纳米抗体的编码基因包括如SEQIDNO：1所示的氨基酸序列所对应的核苷酸序列；(2)将所述靶向间皮素的嵌合抗原受体的编码基因插入到基因传递载体中，得到重组基因传递载体；(3)将所述重组基因传递载体进行包装并转染宿主细胞，得到重组慢病毒；(4)将所述重组慢病毒转染CD3阳性T淋巴细胞，获得靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞。10.如权利要求1或2所述的靶向间皮素的纳米抗体、如权利要求3‑6任一项所述的靶向间皮素的嵌合抗原受体、如权利要求7所述的或如权利要求9所述的制备方法制得的靶向间皮素的嵌合抗原受体T细胞、如权利要求8所述的重组载体在制备诊断和/或治疗过表达间皮素的恶性肿瘤的药物中的应用。2CN115850490A说明书1/6页靶向间皮素的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用技术领域[0001]本申请涉及生物医药领域，具体涉及一种靶向间皮素的纳米抗体、嵌合抗原受体及其应用。背景技术[0002]间皮素(Mesothelin，meso)是一种细胞表面糖蛋白，在正常组织中很少表达，但是在间皮瘤、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌等肿瘤中均有高表达，因此间皮素有可能成为癌症治疗的重要靶点。[0003]目前针对间皮素为靶点的抗癌药物多是以抗体类药物为主，少数有报道CAR‑T(嵌合抗原受体T细胞)疗法。然而，靶向meso的抗体类药物的临床治疗效果有限，靶向meso的CAR‑T所用的单链抗体(即，scFv)基本上都是含有重链可变区和轻链可变区的小鼠来源抗体，对嵌合抗原受体的表达和稳定不利，同时在体