一种重组NMDA受体蛋白及其应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115850513A(43)申请公布日2023.03.28(21)申请号202211295996.4C12N7/01(2006.01)(22)申请日2022.10.21C12N5/10(2006.01)G01N33/68(2006.01)(71)申请人北京和杰创新生物医学科技有限公司地址102600北京市大兴区北京经济技术开发区科创十四街99号7幢三层3单元301、302室(72)发明人朱京山(74)专利代理机构北京维正专利代理有限公司11508专利代理师姚启政(51)Int.Cl.C07K19/00(2006.01)C12N15/62(2006.01)C12N15/867(2006.01)权利要求书1页说明书9页序列表（电子公布）附图3页(54)发明名称一种重组NMDA受体蛋白及其应用(57)摘要本申请涉及生物技术的技术领域，具体公开了一种重组NMDA受体蛋白及其应用，所述重组NMDA受体蛋白包括SEQIDNo.1所示的氨基酸序列。本申请还提供了稳定过表达上述重组NMDA受体蛋白的细胞，并将其应用于抗NMDA受体抗体脑炎检测产品的制备中。本申请通过将HSP70蛋白的核心序列与NMDA受体蛋白的完整序列组合，构建的重组NMDA受体蛋白的表达量更高，与抗NMDA受体抗体的结合能力更强。稳定过表达重组NMDA受体的细胞与抗NMDA受体抗体的结合效率更高，进一步提高了检测反应的灵敏性，检测结果更加准确。CN115850513ACN115850513A权利要求书1/1页1.一种重组NMDA受体蛋白，其特征在于，所述重组NMDA受体蛋白包括SEQIDNo.1所示的氨基酸序列。2.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1所述的重组NMDA受体蛋白；优选地，所述核酸分子包括SEQIDNo.2所示的核苷酸序列。3.一种载体，其特征在于，所述载体表达权利要求1所述的重组NMDA受体蛋白；优选地，所述载体含有至少一个拷贝的权利要求2所述的核酸分子。4.一种重组慢病毒，其特征在于，所述重组慢病毒含有至少一个拷贝的权利要求3所述的载体；优选地，所述重组慢病毒的基因组中含有至少一个拷贝的权利要求2所述的核酸分子。5.一种稳定过表达重组NMDA受体的细胞，其特征在于，所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞稳定过表达权利要求1所述的重组NMDA受体蛋白；优选地，所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞中含有权利要求4所述的重组慢病毒；优选地，所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞中含有权利要求3所述的载体；优选地，所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞的基因组中整合有至少一个拷贝的权利要求2所述的核酸分子。6.一种权利要求5所述的稳定过表达重组NMDA受体的细胞的制备方法，其特征在于，所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞的制备方法包括：将权利要求4所述的重组慢病毒侵染受体细胞，筛选，得到所述稳定过表达重组NMDA受体的细胞。7.权利要求1所述的重组NMDA受体蛋白和/或权利要求5所述的稳定过表达重组NMDA受体的细胞在制备抗NMDA受体抗体脑炎检测产品中的应用。8.一种抗NMDA受体抗体脑炎检测产品，其特征在于，所述抗NMDA受体抗体脑炎检测产品包括权利要求1所述的重组NMDA受体蛋白和/或权利要求5所述的稳定过表达重组NMDA受体的细胞。9.一种抗NMDA受体抗体脑炎检测载片，其特征在于，所述抗NMDA受体抗体脑炎检测载片包括权利要求5所述的稳定过表达重组NMDA受体的细胞。10.一种抗NMDA受体抗体脑炎检测试剂盒，其特征在于，所述抗NMDA受体抗体脑炎检测试剂盒包括权利要求5所述的稳定过表达重组NMDA受体的细胞和/或权利要求9所述的抗NMDA受体抗体脑炎检测载片；优选地，所述抗NMDA受体抗体脑炎检测试剂盒还包括FITC标记的人IgG单克隆抗体。2CN115850513A说明书1/9页一种重组NMDA受体蛋白及其应用技术领域[0001]本申请涉及生物技术的技术领域，更具体地说，涉及一种重组NMDA受体蛋白及其应用。背景技术[0002]NMDA受体(N‑methyl‑D‑asparticacidreceptor)即为N‑甲基‑D‑天冬氨酸受体，是离子型谷氨酸受体的一个亚型，分子结构复杂。NMDA受体通过和与其共轭的离子通道以及调节部位三者形成复合体，进而发挥生物学功能。功能性的NMDA受体必须含有NR1亚单位，多个NR2亚单位与NR1共同形成四聚体(或五聚体)。NR1是构成离子通道的基本亚单位；NR2是调节亚单位，不同NR2组成的NMDA受体表现出不同的脑内分布与生理学特性。[0003]NMDA受体是中枢神经系统内一类重要的兴奋性氨基酸(excitatoryaminoacid，EAA)