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本发明涉及RAA法,具体涉及一种实时荧光RAA法检测Vero细胞残留DNA的试剂盒及其检测方法。该试剂盒包括引物和探针,该方法特异性良好,检测灵敏度为0.0696ng/剂量,满足《中国药典》2020年版三部中规定的狂犬疫苗原液中残留DNA应不高于3ng/剂量的检测要求。