羟自由基近红外荧光分子探针及其制备方法与应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN113135904A(43)申请公布日2021.07.20(21)申请号202110430599.2(22)申请日2021.04.21(71)申请人中国药科大学地址211198江苏省南京市江宁区龙眠大道639号(72)发明人田蒋为高涵章琳霞(74)专利代理机构南京苏高专利商标事务所(普通合伙)32204代理人杨晓莉(51)Int.Cl.C07D405/06(2006.01)C09K11/06(2006.01)G01N21/64(2006.01)G01N21/33(2006.01)权利要求书2页说明书5页附图3页(54)发明名称羟自由基近红外荧光分子探针及其制备方法与应用(57)摘要本发明公开了一种羟自由基近红外荧光分子探针及其制备方法与应用。本发明羟自由基近红外荧光分子探针，选择性强、灵敏度高、响应效果好，并且其近红外吸收与荧光的发射特性使其能避免生物自发荧光干扰，可以检测溶液、细胞中的羟自由基，并很好地运用于细胞成像等。并且，其制备工艺简单，成本低，收率高，具有广阔的应用前景，可以大规模生产应用。CN113135904ACN113135904A权利要求书1/2页+1.一种羟自由基近红外荧光分子探针，其特征在于，分子式为C35H33INO5，结构式如下所示：2.权利要求1所述羟自由基近红外荧光分子探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)在惰性气体保护条件下，将化合物1加入到N,N‑二甲基甲酰胺中，搅拌，待完全溶解后，加入三乙胺，搅拌反应；(2)在惰性气体保护条件下，继续加入3,5‑二碘水杨酸，搅拌反应；(3)在惰性气体保护条件下，继续搅拌加热反应；(4)对步骤(3)得到的反应液进行萃取，合并有机层，减压浓缩，冷冻干燥，所得固体即为羟自由基近红外荧光分子探针。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)‑(3)中，所述惰性气体为氮气。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，每1mmol化合物1对应10‑15mLN,N‑二甲基甲酰胺。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述化合物1与三乙胺的摩尔比为1:3‑5。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，所述化合物1与3,5‑二碘水杨酸的摩尔比为1:3‑5。7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，所述反应温度为80‑90℃。8.权利要求1所述羟自由基近红外荧光分子探针在检测羟自由基中的应用。9.权利要求1所述羟自由基近红外荧光分子探针在体外紫外荧光响应和细胞成像中的应用。2CN113135904A权利要求书2/2页10.根据权利要求9所述应用，其特征在于，所述细胞成像为活体细胞成像。3CN113135904A说明书1/5页羟自由基近红外荧光分子探针及其制备方法与应用技术领域[0001]本发明属于荧光分子探针技术，具体涉及一种羟自由基近红外荧光分子探针及其制备方法与应用。背景技术[0002]细胞内活性氧是一类反应性物质，主要通过电子转移反应起源于氧，它们在各种细胞过程中起着至关重要的信号传导因子的作用，其中，羟自由基由于具有特别强的氧化性和2.31V的单电子还原电位而备受关注。大量研究证实，羟自由基可以通过碱基的氧化羟基化作用与DNA反应，诱导脂质过氧化，并对蛋白质造成氧化损伤。过量产生的羟自由基与各种氧化应激相关的病理生理过程有关，例如炎症，癌症和心血管疾病等。然而，由于其低浓度，短寿命和高反应性导致的检测困难，在生理和病理过程中羟自由基的性质仍然知之甚少。因此，开发用于生物系统中羟自由基的高灵敏度和选择性检测工具非常重要。[0003]传统检测羟自由基的荧光探针多数都是可见光激发，这种探针在与羟自由基响应后产生的荧光很容易受到生物体自发荧光的干扰。而近红外荧光分子探针具有灵敏度高，选择性好，组织穿透性强，检测方便等优点，相较于传统羟自由基的检测方法具有很大的优势。但是如何得到性能更加优异的近红外荧光分子探针，还需要进一步研究。发明内容[0004]发明目的：针对现有技术存在的问题，本申请提供了一种具有良好的选择性的羟自由基近红外荧光分子探针，并提供了其制备方法以及应用。[0005]技术方案：本申请所述一种羟自由基近红外荧光分子探针，其分子式为C35H33INO5+，结构式如下：[0006][0007]本申请所述的羟自由基近红外荧光分子探针的制备方法，反应路线如下所示：4CN113135904A说明书2/5页[0008][0009]包括如下步骤：[0010](1)在惰性气体保护条件下，将化合物1加入到N,N‑二甲基甲酰胺中，搅拌，待完全溶解后，加入三乙胺，搅拌反应；[0011](2)在惰性气体保护条件下，继续加