一种改善肠道菌群平衡的益生菌剂及其制备方法和应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115944665A(43)申请公布日2023.04.11(21)申请号202211263815.XA23L33/21(2016.01)(22)申请日2022.10.17A23L33/105(2016.01)A23L33/12(2016.01)(71)申请人天津市宝恒生物科技有限公司A23L33/16(2016.01)地址300450天津市滨海新区华苑产业区A23L33/15(2016.01)鑫茂科技园AB座四层J单元4012A23L33/135(2016.01)(72)发明人李倩舒威A23P10/30(2016.01)(74)专利代理机构北京智宇正信知识产权代理A61K35/742(2015.01)事务所(普通合伙)11876A61K31/715(2006.01)专利代理师李明卓A61K31/19(2006.01)A61K31/702(2006.01)(51)Int.Cl.A61K31/733(2006.01)A61K36/45(2006.01)A61K47/36(2006.01)A61P1/00(2006.01)A61P29/00(2006.01)A61P1/10(2006.01)权利要求书3页说明书16页附图1页(54)发明名称一种改善肠道菌群平衡的益生菌剂及其制备方法和应用(57)摘要本发明提出了一种改善肠道菌群平衡的益生菌剂及其制备方法和应用，属于益生菌技术领域。从甘蔗和山楂中提取得到多糖经过复合酶酶解后，经嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、多形拟杆菌发酵得到多糖酶解发酵产物，与多糖酶解发酵产物、短链脂肪酸组合物、益生元组合物和凝结芽孢杆菌TQ33混合均匀得到活性组合物，以交联羧基化壳聚糖为壁材，制得改善肠道菌群平衡的益生菌剂，能够有效改善肠道菌群结构、调节肠道功能紊乱、维持肠道内菌群平衡和提高机体免疫水平、促进营养物质代谢和利用，且能在进入肠道后被降解释放出来，直接作用于肠道，起到高效的调节肠道菌群的作用。CN115944665ACN115944665A权利要求书1/3页1.一种改善肠道菌群平衡的益生菌剂的制备方法，其特征在于，从甘蔗和山楂中提取得到多糖经过复合酶酶解后，经嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、多形拟杆菌发酵得到多糖酶解发酵产物，与多糖酶解发酵产物、短链脂肪酸组合物、益生元组合物和凝结芽孢杆菌TQ33混合均匀得到活性组合物，以交联羧基化壳聚糖为壁材，制得改善肠道菌群平衡的益生菌剂；所述复合酶为纤维素酶、木聚糖酶和甘露聚糖酶的复配混合物。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1.甘蔗多糖的提取：将新鲜甘蔗去皮，切段，榨汁，过滤，得到甘蔗汁，加热至35‑45℃后加入磷酸，搅拌混合均匀，加入碳酸钠调节溶液pH值为6.9‑7.1，加热至55‑65℃后加入亚硫酸溶液，搅拌均匀，加入碳酸钠调节溶液pH值为6.9‑7.1，加热至75‑85℃后加入聚丙烯酰胺溶液，搅拌混合均匀，沉淀，过滤，得到甘蔗清汁；向甘蔗清汁中加入三氯乙酸‑乙腈溶液，沉淀，过滤，滤液中加入乙醇，沉淀，离心，沉淀物复溶于水后，再次加入乙醇沉淀，离心，洗涤沉淀物，干燥，得到甘蔗多糖；S2.山楂多糖的提取：将新鲜山楂去核，干燥，粉碎，得到山楂粉，加入水中，加热至沸腾提取，加入乙醇，沉淀，离心，沉淀物复溶于水后，再次加入乙醇沉淀，离心，洗涤沉淀物，干燥，得到山楂多糖；S3.甘蔗和山楂多糖的酶解：将步骤S1制得的甘蔗多糖和步骤S2制得的山楂多糖混合溶于水中，加入复合酶酶解，灭酶，过滤，得到甘蔗和山楂多糖的酶解产物；S4.菌种的活化：将嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、多形拟杆菌接种于高氏培养基中，微缺氧条件下培养成菌种种子液；S5.甘蔗和山楂多糖酶解产物的发酵：将步骤S4中制得的嗜酸乳杆菌、乳双歧杆菌、多形拟杆菌菌种种子液接种至步骤S3制得的甘蔗和山楂多糖的酶解产物中，微缺氧条件下发酵培养第一时间段，然后加入含有铁离子和维生素组合物的水溶液，继续发酵培养第二时间段，过滤，浓缩，冷冻干燥，得到多糖酶解发酵产物；S6.短链脂肪酸组合物的制备：将乙酸、丙酸、丁酸混合均匀，制得短链脂肪酸组合物；S7.益生元组合物的制备：将菊粉、人乳寡糖、蓝莓多酚混合均匀，制得益生元组合物；S8.活性组合物的制备：将步骤S5制得的多糖酶解发酵产物、步骤S6制得的短链脂肪酸组合物、步骤S7制得的益生元组合物和凝结芽孢杆菌TQ33混合均匀，制得活性组合物；S9.羧基化壳聚糖的制备：将壳聚糖溶于酸液中后，加入α‑酮戊二酸，加热搅拌反应第一时间段后，加入硼氢化钠，继续搅拌反应第二时间段，加入乙醇，过滤，洗涤，干燥，研细，得到羧基化壳聚糖；S10.改善肠道菌群平衡的益生菌剂的制备：将步骤S8制得的活性组合物溶于水中，加入羧基化壳聚糖，搅