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(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115120646A(43)申请公布日2022.09.30(21)申请号202210851358.XA61P3/10(2006.01)(22)申请日2022.07.19A61P3/06(2006.01)A61P3/04(2006.01)(71)申请人无锡市第二人民医院A61P3/00(2006.01)地址214000江苏省无锡市中山路68号A61K35/747(2015.01)(72)发明人朱敏敏梁宵顾珍任奥林A61K35/742(2015.01)孙柯娜常翰轩A61K35/644(2015.01)(74)专利代理机构无锡智麦知识产权代理事务A61K31/352(2006.01)所(普通合伙)32492A61K35/24(2015.01)专利代理师王普慧(51)Int.Cl.A61K36/752(2006.01)A61P1/12(2006.01)A61P1/00(2006.01)A61P29/00(2006.01)A61P1/10(2006.01)权利要求书2页说明书10页附图2页(54)发明名称一种平衡肠道菌群的益生菌组合物及其制备方法和应用(57)摘要本发明提出了一种平衡肠道菌群的益生菌组合物及其制备方法和应用,属于益生菌技术领域,将熟化的柚子皮与蜂蜜混合后,接种凝结芽孢杆菌TQ33发酵,然后与含有蒲公英提取物、葛根素、碳源、氮源、维生素和无机盐的液体培养基混合,接种嗜酸性乳酸杆菌JYLA‑191和酿酒酵母菌发酵,得到的发酵混合物与火麻仁油、夜明砂混合均匀后,制得平衡肠道菌群的益生菌组合物。本发明制得的组合物具有良好的改善和平衡菌群的效果,有助于抑制致病菌繁殖,促进有益菌繁殖,并调节肠道菌群丰度,对于糖尿病、高血脂、高血糖、肥胖等代谢疾病有很好的调节作用。CN115120646ACN115120646A权利要求书1/2页1.一种平衡肠道菌群的益生菌组合物的制备方法,其特征在于,将熟化的柚子皮与蜂蜜混合后,接种凝结芽孢杆菌TQ33发酵,然后与含有蒲公英提取物、葛根素、碳源、氮源、维生素和无机盐的液体培养基混合,接种嗜酸性乳酸杆菌JYLA‑191和酿酒酵母菌发酵,得到的发酵混合物与火麻仁油、夜明砂混合均匀后,制得平衡肠道菌群的益生菌组合物。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.柚子皮的处理:将柚子皮洗净,切片后,熟化处理,得到熟柚子皮;S2.菌种的活化:将凝结芽孢杆菌TQ33、嗜酸性乳酸杆菌JYLA‑191和酿酒酵母菌分别接种到高氏培养基中,微氧条件下,培养成菌种种子液;S3.蜂蜜柚子的发酵处理:将步骤S1制得的熟柚子皮与蜂蜜混合均匀后,接种步骤S2制得的凝结芽孢杆菌TQ33,微氧条件下,发酵培养,得到初步发酵处理的蜂蜜柚子混合物;S4.蒲公英的提取:将蒲公英洗净,干燥,粉碎,加入乙酸乙酯‑正丁醇的混合溶剂,加热提取,过滤,浓缩干燥,得到的固体用水洗,干燥,得到蒲公英提取物;S5.液体培养基的制备:将步骤S4制得的蒲公英提取物、葛根素、碳源、氮源、维生素和无机盐用无菌水溶解,混合均匀后,用PBS溶液调节培养基pH值,灭菌备用;S6.发酵处理:将步骤S3制得的初步发酵处理的蜂蜜柚子混合物加入步骤S5制得的液体培养基中,接种步骤S2中的嗜酸性乳酸杆菌JYLA‑191和酿酒酵母菌,微氧条件下,发酵培养,得到发酵混合物;S7.平衡肠道菌群的益生菌组合物的制备:将火麻仁油、夜明砂混合均匀后,加入步骤S6制得的发酵混合物中,搅拌均匀,得到平衡肠道菌群的益生菌组合物。3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤S1中所述熟化处理的条件为90‑120℃蒸煮10‑20min;步骤S2中所述菌种种子液的含菌量为107‑109cfu/mL;所述培养条件为32‑36℃培养12‑18h;步骤S3中所述熟柚子皮与蜂蜜的质量比为(2‑3):1;所述凝结芽孢杆菌TQ33的接种量为4‑7%;所述发酵培养温度为35‑38℃,时间为18‑24h。4.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤S4中所述乙酸乙酯‑正丁醇的混合溶剂的体积比为(2‑5):5;所述蒲公英与混合溶剂的固液比为1:(2‑5)g/mL;所述加热至温度为65‑75℃,提取时间为3‑5h。5.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,步骤S5中所述蒲公英提取物、葛根素、碳源、氮源、维生素、无机盐和无菌水的质量比为(2‑5):(1‑2):(15‑25):(10‑15):(1‑3):(0.5‑1):1000;所述碳源选自糖蜜、菊粉、葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖、果糖、可溶性淀粉中的至少一种;所述氮源选自氨水、尿素、铵盐、硝酸盐、鱼粉中的至少一种;所述无机盐选自氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁、硫酸镁、氯化亚铁