降钙素原检测试纸条及其制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利(10)授权公告号(10)授权公告号CNCN103018456103018456B(45)授权公告日2014.10.01(21)申请号201210498784.6鲁敏翔等.胶体金法检测降钙素原诊断儿科感染性疾病的临床性能评价.《武汉大学学报((22)申请日2012.11.29医学版)》.2012,第33卷(第6期),(73)专利权人深圳市伯劳特生物制品有限公司高红军等.两种降钙素原检测方法的比较研地址518054广东省深圳市南山区月亮湾大究.《医学检验》.2011,第8卷(第32期),道2076号中国高科大厦六楼A2审查员胡晓佳(72)发明人马伟民张永顶马新民(74)专利代理机构深圳市深佳知识产权代理事务所(普通合伙)44285代理人唐华明(51)Int.Cl.G01N33/577(2006.01)G01N33/533(2006.01)(56)对比文件CN201886025U,2011.06.29,CN1811449A,2006.08.02,CN101617230A,2009.12.30,权权利要求书1页利要求书1页说明书5页说明书5页附图1页附图1页(54)发明名称降钙素原检测试纸条及其制备方法(57)摘要本发明涉及生物技术领域，公开了一种降钙素原检测试纸条及其制备方法。本发明所述降钙素原检测试纸包括依次设置的加样区、结合物释放区、反应区和吸水区；所述结合物释放区为包被量子点标记的降钙素原单克隆抗体的结合物释放垫；所述反应区为分为测试区和控制区，所述反应区为测试区包被降钙素原，控制区包被抗鼠IgG抗体的固体支持物。本发明所述降钙素原检测试纸以新型荧光染料量子点替代传统的胶体金，能够准确、定量、快速、灵敏的检测人血清中的降钙素原，并且所需仪器不同于以往检验科的大型昂贵仪器，只需一台小型的荧光定量分析仪即可，实现了实时检测。CN103018456BCN1038456BCN103018456B权利要求书1/1页1.一种降钙素原检测试纸条，其特征在于，包括依次设置的加样区、结合物释放区、反应区和吸水区；所述结合物释放区为包被量子点标记的降钙素原单克隆抗体的结合物释放垫，所述量子点粒径为5nm，激发波长为365nm，发射波长为605nm；所述反应区为分为测试区和控制区，所述反应区为测试区包被降钙素原，控制区包被抗鼠IgG抗体的固体支持物；所述量子点标记的降钙素原单克隆抗体的制备方法为向1mLpH7.4、50mM的磷酸盐缓冲液中加入2μmol量子点和1mg抗人降钙素原单克隆抗体，室温下温和振荡2小时，然后12000r/min离心30min，取沉淀即得。2.根据权利要求1所述的降钙素原检测试纸条，其特征在于，还包括背衬，所述加样区、结合物释放区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上。3.根据权利要求1所述的降钙素原检测试纸条，其特征在于，所述结合物释放垫为玻璃纤维素膜。4.根据权利要求1所述的降钙素原检测试纸条，其特征在于，所述固体支持物为硝酸纤维素膜。5.权利要求1-4任意一项所述降钙素原检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括：步骤1：将量子点标记的降钙素原单克隆抗体喷涂在结合物释放垫上获得结合物释放区；所述量子点粒径为5nm，激发波长为365nm，发射波长为605nm；所述量子点标记的降钙素原单克隆抗体的制备方法为向1mLpH7.4、50mM的磷酸盐缓冲液中加入2μmol量子点和1mg抗人降钙素原单克隆抗体，室温下温和振荡2小时，然后12000r/min离心30min，取沉淀即得；步骤2：将降钙素原和抗鼠IgG抗体喷涂在反应区的固体支持物上，分别形成测试区、控制区获得反应区；步骤3：将加样区、结合物释放区、反应区和吸水区依次相互搭接的粘贴在背衬上即得。2CN103018456B说明书1/5页降钙素原检测试纸条及其制备方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体涉及降钙素原检测试纸条及其制备方法。背景技术[0002]降钙素原(Procalcitonin，PCT)是降钙素的前体，主要在甲状腺滤泡旁细胞内合成，是由116个氨基酸组成的糖蛋白，分子量大约13KD。它可以在酶的作用下逐步裂解成57个氨基酸的氨基PCT，32个氨基酸的CT和21个氨基酸的降钙蛋白。降钙素原是11号染色体上降钙素I基因(CAIC-I)的表达产物，在不存在感染的情况下，甲状腺外CALC-I表达被抑制，而主要局限于甲状腺和肺的神经内分泌细胞有一定程度的表达，在细菌感染时可诱导全身各种组织多种类型细胞CALC-I表达和PCT连续性释放。降钙素原的生成非常快，内毒素刺激反应2h~6h之内即升高(正常人血浆中的PCT浓度<0.15μg/L)，PCT值的下降取决于其在血浆中的衰减和新生成的PCT间的平衡，PCT的半