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外泌体分离纯化方法.pdf
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外泌体分离纯化方法.pdf
本发明涉及一种外泌体分离纯化方法,取含有外泌体的体液或培养液,经过阴离子交换层析、阳离子交换层析和分子筛层析后获得纯化后的外泌体溶液。通过这样的提纯方法即便在大规模的外泌体需求中,也能够低成本、高效率的获得高纯度的外泌体;与现有的外泌体纯化方法如离心法、PEG多聚物沉淀法、亲和层析法、超滤法、分子筛尺寸排阻色谱法相比,本发明可以实现不同体积(100ml至500L)外泌体纯化,尤其杂质蛋白较多的乳源制品,也可获得纯度99%以上的乳源外泌体,同时具有低成本及高回收率的优势,能满足工业化生产的需求。
2023-05-24
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一种外泌体分离纯化方法.pdf
本发明涉及一种外泌体分离纯化方法，取含有外泌体的体液或培养液，经过阴离子交换层析和/或分子筛层析后获得纯化后的外泌体溶液。通过这样的提纯方法即便在大规模的外泌体需求中，也能够低成本、高效率的获得高纯度的外泌体；与现有的外泌体纯化方法如离心法、PEG多聚物沉淀法、亲和层析法、超滤法、分子筛尺寸排阻色谱法相比，本发明可以实现不同体积（100ml至500L）外泌体纯化，尤其杂质蛋白较多的乳源制品，也可获得纯度99%以上的乳源外泌体，同时具有低成本及高回收率的优势，能满足工业化生产的需求。
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一种高效的外泌体分离纯化方法.pdf
本发明涉及分子生物技术领域，特别涉及一种高效的外泌体分离纯化方法，包括分离血浆，加入阳离子聚合物孵育；滤膜截留与阳离子聚合物结合的外泌体并漂洗外泌体；离液剂洗脱外泌体；加入磁珠吸附并富集外泌体；洗脱获得外泌体浓缩液。与现有技术相比，本发明不借助大型离心设备，采用阳离子聚合物对外泌体进行包覆后，采用离液剂解除阳离子聚合物与外泌体作用，通过简单的过滤，实现外泌体回收，然后通过磁性吸附剂对回收的外泌体进行浓缩，纯化。本发明有效缩短分离时间、提高外泌体回收效率、提高处理样本通量、提升外泌体分离纯度、降低外泌体分离
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本发明提供一种外泌体的分离方法，所述分离方法至少包括以下步骤：（1）向目标细胞中导入带有标签的CD63，培养；（2）离心后取上清液；（3）向上清液中加入磁性体，所述磁性体上含有能够与CD63上的标签特异性结合的标记物，孵育；（4）将上清液置于磁场中；（5）去除上清液后加入缓冲液，加入分选柱，利用缓冲液洗脱分选柱上滞留的外泌体，并收集。采用本发明所述的收集方法，收集效率高。
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