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本发明公开了一种常温活菌酸奶及其制备方法,所述常温活菌酸奶所用原料包括蔗糖7?8.5%、乳蛋白粉0.3?2.3%、增稠剂0.3?0.8%、嗜热链球菌0.002?0.004%、植物乳杆菌0.00001?0.001%,余量为原料乳,上述百分比为占原料总质量的质量百分比,其制备方法依次为:(1)将原料乳预热,加入蔗糖、乳蛋白粉、增稠剂,搅拌混合;(2)将步骤(1)中得到的物料均质、杀菌并冷却得到发酵基质;(3)在发酵基质中加入嗜热链球菌和植物乳杆菌进行发酵,至酸度达到发酵终点;(4)将步骤(3)得到的物料搅拌均匀,无菌灌装得到常温活菌酸奶产品。本发明克服了常温酸奶无活菌、生产成本高等缺点,同时克服了低温酸奶不能脱离冷链的限制。